背景:目前对抗氧化基因硫氧还蛋白的研究逐步受到重视,但从基因治疗的角度对其研究较少.目的:采用硫氧还蛋白转染 Neuro-2A 细胞,观察细胞内表达相应蛋白因子对细胞的具体保护效果,并分析其发挥保护作用的可能机制.方法:以质粒 PIRES2-EGFP-TRX 转染 Neuro-2A 细胞,经 RT-PCR 鉴定,建立能够稳定表达硫氧还蛋白的细胞株.利用不同浓度的 H2O2处理正常细胞及转染细胞,建立氧化应激模型.观察受到氧化损伤后两组细胞的形态学、存活率、还原型谷胱甘肽的浓度及细胞内 DNA 链断裂情况.结果与结论:经 H2O2作用后,两组细胞形态均出现损伤,但转染组细胞比正常组细胞损伤减轻、细胞存活率升高、细胞内还原型谷胱甘肽水平增高、DNA 链断裂程度减轻.说明人类硫氧还蛋白基因可以在 Neuro-2A 细胞中被重组并顺利表达,对细胞具有一定的保护作用;这一作用可能是通过清除氧自由基,维持细胞内还原型谷胱甘肽水平,从而保护细胞 DNA 免受氧化性损伤来实现的.
作者：汪龙；吕国枫
来源：中国组织工程研究 2013 年 11期
