背景:有研究表明,在卵黄囊造血、胎肝造血和胚胎干细胞向造血干细胞分化过程中,酸性成纤维细胞生长因子可强烈表达.目的:探讨酸性成纤维细胞生长因子对小鼠胚胎干细胞造血分化的作用,在拟胚体培养阶段施加酸性成纤维细胞生长因子,验证酸性成纤维细胞生长因子对造血形成细胞产生的调控作用.方法:培养小鼠胚胎干细胞,将饲养层上生长状态良好的小鼠胚胎干细胞用胰酶消化成单个细胞后,利用悬滴法制备拟胚体,拟胚体继续悬浮培养,以1,2和5μg/L 酸性成纤维细胞生长因子分别培养3,5,7,9 d,通过免疫荧光法检测胚胎干细胞与拟胚体中酸性成纤维细胞生长因子的表达,流式细胞术检测Flk-1+与 CD133+阳性细胞率.结果与结论:酸性成纤维细胞生长因子在拟胚体中呈阳性表达.在5μg/L 酸性成纤维细胞生长因子作用下,Flk-1+细胞随时间增加表达增加,CD133+细胞表达模式与 Flk-1+细胞类似.在1μg/L 时,Flk-1+细胞在7 d 时表达达到高峰,随后下降.CD133+细胞表达结果类似.而在2μg/L 时,5 d 时 Flk-1+细胞表达升高,随后下降,在9 d 时表达又增高.而 CD133+细胞则总体呈现升高趋势.酸性成纤维细胞生长因子可促进 Flk-1+与 CD133+细胞的产生,证明酸性成纤维细胞生长因子能够有效促进拟胚体的扩增以及成血管血液干细胞的产生与增殖.
作者：许婷婷；张海萍；王跃嗣
来源：中国组织工程研究 2013 年 14期
