背景：研究证实，从人类的皮肤中成功分离出皮肤源性前体细胞并在体外长期培养，可分化为神经元、胶质细胞、平滑肌细胞以及具有周围神经元表型的细胞和许旺细胞。<br> 目的：进一步证实人皮肤组织来源的多能干细胞的培养方法和多方向分化能力，尤其向神经细胞、成骨细胞分化的可能性。<br> 方法：采用胰蛋白酶消化法培养人皮肤组织来源的前体细胞，应用免疫细胞化学的方法对细胞进行鉴定。取三四代的细胞分别进行神经元诱导分化、成骨细胞诱导分化、von Kossa 法钙染色、软骨细胞诱导分化、甲苯胺蓝染色、免疫组织化学染色及苏丹黑染色。观察皮肤来源的前体细胞巢蛋白、波形蛋白、βⅢ管蛋白、S100及Ⅱ型胶原的表达。<br> 结果与结论：用胰蛋白酶消化法培养出人皮肤组织来源的前体细胞，增殖聚集能够形成悬浮的细胞球，在培养的不同时间都可检测到巢蛋白阳性的细胞。培养的全部细胞表达波形蛋白，在贴壁的细胞中也能检测到βⅢ管蛋白的表达。利用丹参诱导皮肤源性前体细胞向神经元样细胞分化，表达神经细胞的标志物。应用成骨细胞诱导，von Kossa 染色发现培养皿中有黑色的钙化结节产生，说明皮肤源性前体细胞能够分化为成骨细胞；将皮肤源性前体细胞向软骨细胞诱导，甲苯胺蓝染色强阳性，部分
作者：刘桂英；杨立业；李文玉；郑佳坤
来源：中国组织工程研究 2013 年 36期
