背景:细胞移植治疗受区存在氧化应激过程,影响疗效。研究氧化应激对牙髓干细胞的影响及机制方面的报道较少。<br> 目的:分离培养人牙髓干细胞,分析加入过氧化氢(H2O2)对其衰老程度的影响。<br> 方法:牙髓干细胞分为3组,分别用PBS、100μmol/L H2O2、200μmol/L H2O2刺激2 h。倒置显微镜下观察细胞形态,β-半乳糖苷酶染色观察细胞衰老程度,BrdU试剂盒和细胞计数法检测细胞增殖能力,免疫荧光检测细胞骨架排列情况和sirt1蛋白的表达,Western Blot法测定sirt1、p16蛋白的表达。结果与结论:①牙髓干细胞呈成纤维细胞样梭形外观。②H 2O2刺激后,细胞体积增大、β-半乳糖苷酶染色加深、细胞增殖能力降低,随着H2O2浓度增加,牙髓干细胞衰老增强,在此过程中,p16表达上调,sirt1表达受到抑制。③结果表明H2O2刺激促进牙髓干细胞衰老,sirt1、p16参与了此过程,为牙髓干细胞移植提供了理论基础和实验支持。
作者:徐克;冯桂娟;冯兴梅;黄丹;郑科;唐恩溢
来源:中国组织工程研究 2016 年 20卷 10期