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背景:人类白细胞抗原F介导转录因子10(human leukocyte antigen F-associated transcript 10,FAT10)在结肠癌等很多种肿瘤细胞中会发生高表达,但其与食管癌的关系报道较少。<br>  目的:观察siRNA干扰技术沉默类泛素蛋白(FAT10)基因表达对人食管癌细胞EC9706细胞的侵袭、凋亡及及肿瘤干细胞特性的影响。<br>  方法:根据FAT10 mRNA编码序列设计并合成干扰siRNA序列,瞬时转染EC9706细胞。将人食管癌细胞EC9706细胞分为3组,设FAT10 siRNA组,阴性对照组、空白对照组。用RT-PCR和Western blot法分别从mRNA水平和蛋白水平检测FAT10及bcl-2的表达;CCK-8法测定细胞体外增殖能力;流式细胞技术观察细胞凋亡及肿瘤干细胞标志物CD44+CD133+的表达;TUNEL染色检测各组细胞的的凋亡、细胞侵袭小室法检测各组细胞的体外侵袭力。<br>  结果与结论:①RT-PCR和Western blot显示,FAT10 siRNA组较阴性对照组和空白对照组FAT10及bcl-2 mRNA和蛋白表达都明显下降(P<0.05);②肿瘤干细胞标志物CD44+CD133+的表达比例显著降低(P<0.05);③与阴性对照组和空白对照组相比,FAT10 siRNA组细胞的凋亡率明显升高(P<0.01),增殖、侵袭力显著下降(P<0.05)。④结果表明,特异性沉默FAT10基因表达能够降低食管癌细胞的侵

作者:王志强;张建军

来源:中国组织工程研究 2016 年 20卷 50期

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作者:
王志强;张建军
来源:
中国组织工程研究 2016 年 20卷 50期
标签:
干细胞 肿瘤干细胞 RNA干扰 FAT10 凋亡 食管癌
背景:人类白细胞抗原F介导转录因子10(human leukocyte antigen F-associated transcript 10,FAT10)在结肠癌等很多种肿瘤细胞中会发生高表达,但其与食管癌的关系报道较少。<br>  目的:观察siRNA干扰技术沉默类泛素蛋白(FAT10)基因表达对人食管癌细胞EC9706细胞的侵袭、凋亡及及肿瘤干细胞特性的影响。<br>  方法:根据FAT10 mRNA编码序列设计并合成干扰siRNA序列,瞬时转染EC9706细胞。将人食管癌细胞EC9706细胞分为3组,设FAT10 siRNA组,阴性对照组、空白对照组。用RT-PCR和Western blot法分别从mRNA水平和蛋白水平检测FAT10及bcl-2的表达;CCK-8法测定细胞体外增殖能力;流式细胞技术观察细胞凋亡及肿瘤干细胞标志物CD44+CD133+的表达;TUNEL染色检测各组细胞的的凋亡、细胞侵袭小室法检测各组细胞的体外侵袭力。<br>  结果与结论:①RT-PCR和Western blot显示,FAT10 siRNA组较阴性对照组和空白对照组FAT10及bcl-2 mRNA和蛋白表达都明显下降(P<0.05);②肿瘤干细胞标志物CD44+CD133+的表达比例显著降低(P<0.05);③与阴性对照组和空白对照组相比,FAT10 siRNA组细胞的凋亡率明显升高(P<0.01),增殖、侵袭力显著下降(P<0.05)。④结果表明,特异性沉默FAT10基因表达能够降低食管癌细胞的侵