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背景:研究证实,维生素C除了具有抗氧化作用外,还具有促进细胞增殖的重要作用,但至今为止,有关维生素C对高糖环境下人脂肪干细胞的增殖作用及相关分子机制尚不明确.目的:研究维生素C促进高糖环境下人脂肪干细胞增殖的作用及相关分子机制.方法:取高塘环境中培养的第3代人脂肪干细胞,分别以0,100,150,200,250,300μmol/L维生素C处理,以低糖环境中培养的细胞为对照,MTT法筛选最佳维生素C干预浓度及处理时间,进行Western Blot检测.EdU检测:将高糖环境中培养的人脂肪干细胞分4组培养,空白对照组不进行任何干预,维生素C组加入最佳浓度维生素C,LY294002组加入PI3K/AKT信号通路抑制剂LY294002与最佳浓度维生素C,U0126组加入ERK/MAPK信号通路抑制剂U0126与最佳浓度维生素C,以低糖环境中培养的细胞为对照,干预48 h后,检测EdU标记阳性细胞数.结果与结论:①CCK-8法检测:200μmol/L维生素C促进高糖环境下人脂肪干细胞的增殖作用最强,所以此为最佳干预浓度,最佳处理时间为48 h;②Western Blot检测:对照组、0μmol/L维生素C处理组、200μmol/L维生素C处理组p-AKT蛋白表达无差异,200μmol/L维生素C处理组p-ERK蛋白表达高于0μmol/L维生素C处理组(P<0.01);③EdU检测:维生素C组、LY294002组、对照组EdU标记阳性细胞数高于空

作者:李江锋;丁世超;戚亚伟;李瑾;曾国芳;赖巧;刘莉;张培华

来源:中国组织工程研究 2017 年 21卷 13期

知识库介绍

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作者:
李江锋;丁世超;戚亚伟;李瑾;曾国芳;赖巧;刘莉;张培华
来源:
中国组织工程研究 2017 年 21卷 13期
标签:
干细胞 脂肪干细胞 维生素C 糖尿病难愈创面 高糖环境 增殖 ERK/MAPK信号通路 国家自然科学基金
背景:研究证实,维生素C除了具有抗氧化作用外,还具有促进细胞增殖的重要作用,但至今为止,有关维生素C对高糖环境下人脂肪干细胞的增殖作用及相关分子机制尚不明确.目的:研究维生素C促进高糖环境下人脂肪干细胞增殖的作用及相关分子机制.方法:取高塘环境中培养的第3代人脂肪干细胞,分别以0,100,150,200,250,300μmol/L维生素C处理,以低糖环境中培养的细胞为对照,MTT法筛选最佳维生素C干预浓度及处理时间,进行Western Blot检测.EdU检测:将高糖环境中培养的人脂肪干细胞分4组培养,空白对照组不进行任何干预,维生素C组加入最佳浓度维生素C,LY294002组加入PI3K/AKT信号通路抑制剂LY294002与最佳浓度维生素C,U0126组加入ERK/MAPK信号通路抑制剂U0126与最佳浓度维生素C,以低糖环境中培养的细胞为对照,干预48 h后,检测EdU标记阳性细胞数.结果与结论:①CCK-8法检测:200μmol/L维生素C促进高糖环境下人脂肪干细胞的增殖作用最强,所以此为最佳干预浓度,最佳处理时间为48 h;②Western Blot检测:对照组、0μmol/L维生素C处理组、200μmol/L维生素C处理组p-AKT蛋白表达无差异,200μmol/L维生素C处理组p-ERK蛋白表达高于0μmol/L维生素C处理组(P<0.01);③EdU检测:维生素C组、LY294002组、对照组EdU标记阳性细胞数高于空