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背景:研究认为,内质网应激与糖尿病、扩张性心肌病、神经退行性疾病等许多慢性疾病的发生相关,而它与骨关节炎的发生也密切相关.目的:分析内质网应激对大鼠关节软骨细胞生存状态的影响,以及内质网应激在体内对大鼠骨关节炎发生发展的影响.方法:在体外分离培养大鼠关节软骨细胞,应用10 mg/L衣霉素建立内质网应激模型.Western Blot检测内质网应激相关蛋白葡萄糖调节蛋白78和C/EBP同源蛋白的表达,并分别应用CCK-8和AnnexinV-FITC(流式法)检测软骨细胞增殖活性及细胞凋亡情况.体内实验选取SD大鼠15只,行前交叉韧带切断、内侧半月板切除术制作膝关节骨关节炎模型,于关节腔分别注射内质网应激激动剂衣霉素、抑制剂牛磺熊去氧胆酸和空白对照PBS,4周后应用苏木精-伊红染色评估各组关节退变情况.结果与结论:①应用衣霉素刺激大鼠关节软骨细胞后,葡萄糖调节蛋白78和C/EBP同源蛋白的表达均显著升高;同时,软骨细胞的细胞增殖活性在衣霉素刺激后逐渐下降,而细胞凋亡率则明显升高;②在大鼠骨关节炎模型中,大体标本及苏木精-伊红染色结果均显示,关节腔注射衣霉素组骨关节炎进展加速,而关节腔注射牛磺熊去氧胆酸组骨关节炎进展减慢;③结论:内质网应激的过度激活导致体外培养的大鼠关节软骨细胞增殖活性降低及细胞凋亡增加

作者:吴浩;孟志超;曹永平;潘利平;周星彤;杨昕;刘恒;王瑞;崔云鹏;李翔;李卓扬

来源:中国组织工程研究 2017 年 21卷 16期

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作者:
吴浩;孟志超;曹永平;潘利平;周星彤;杨昕;刘恒;王瑞;崔云鹏;李翔;李卓扬
来源:
中国组织工程研究 2017 年 21卷 16期
标签:
组织构建 软骨细胞 内质网应激 骨关节炎 凋亡 衣霉素 牛磺熊去氧胆酸 体外实验 体内实验 北京市自然科学基金
背景:研究认为,内质网应激与糖尿病、扩张性心肌病、神经退行性疾病等许多慢性疾病的发生相关,而它与骨关节炎的发生也密切相关.目的:分析内质网应激对大鼠关节软骨细胞生存状态的影响,以及内质网应激在体内对大鼠骨关节炎发生发展的影响.方法:在体外分离培养大鼠关节软骨细胞,应用10 mg/L衣霉素建立内质网应激模型.Western Blot检测内质网应激相关蛋白葡萄糖调节蛋白78和C/EBP同源蛋白的表达,并分别应用CCK-8和AnnexinV-FITC(流式法)检测软骨细胞增殖活性及细胞凋亡情况.体内实验选取SD大鼠15只,行前交叉韧带切断、内侧半月板切除术制作膝关节骨关节炎模型,于关节腔分别注射内质网应激激动剂衣霉素、抑制剂牛磺熊去氧胆酸和空白对照PBS,4周后应用苏木精-伊红染色评估各组关节退变情况.结果与结论:①应用衣霉素刺激大鼠关节软骨细胞后,葡萄糖调节蛋白78和C/EBP同源蛋白的表达均显著升高;同时,软骨细胞的细胞增殖活性在衣霉素刺激后逐渐下降,而细胞凋亡率则明显升高;②在大鼠骨关节炎模型中,大体标本及苏木精-伊红染色结果均显示,关节腔注射衣霉素组骨关节炎进展加速,而关节腔注射牛磺熊去氧胆酸组骨关节炎进展减慢;③结论:内质网应激的过度激活导致体外培养的大鼠关节软骨细胞增殖活性降低及细胞凋亡增加