背景:目前己有较多实验研究证实低频脉冲电磁场在二维支架下促进多种干细胞向成骨细胞分化,但鲜有研究磁场在三维支架下对干细胞的增殖及成骨分化的影响.目的:探讨在聚己内酯3D培养支架环境下,外加低频脉冲电磁场对人脂肪源干细胞增殖及成骨分化的影响.方法:将第3代人脂肪源干细胞接种于聚己内酯3D培养支架匕,分2组培养,实验组给予50 Hz、1 mT的低频脉冲电磁场干预,2 h/d,连续干预14 d.对照组不给于低频脉冲电磁场干预.培养7 d后,Live/Dead染色观察细胞存活情况.培养1,3,5,7 d后,MTT法检测细胞增殖.培养7,14 d,碱性磷酸酶染色及qRT-PCR检测细胞成骨分化水平.结果与结论:①Live/Dead染色:人脂肪源干细胞己长入到支架材料的空隙结构内部,在材料中可保持较高的活性.②细胞增殖:随着培养时间的延长,两组细胞A值均逐渐升高,实验组培养1,3 d的细胞A值高于对照组(P<0.05).③碱性磷酸酶染色:实验组培养7,14 d的碱性磷酸酶阳性染色强于对照组.④qRT-PCR检测:培养7 d时,实验组碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原基因表达量高于对照组(P<0.01).培养14 d时,实验组骨桥蛋白、Runt相关转录因于2、碱性磷酸酶及Ⅰ型胶原的表达量均明显高于对照组(P<0.05).⑤结果表明:在聚己内酯3D培养支架环境下,外加低频脉冲电磁场可促进人脂肪源干细
作者:陈宇雄;陈贤哲;倪梦杉;郭文杰;田京
来源:中国组织工程研究 2017 年 21卷 18期