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背景:获得充足的脂肪干细胞是自体移植修复骨质疏松症骨缺损的前提,因此如何高效、简便、经济的获得自体原代脂肪干细胞是治疗骨质疏松症的关键.目的:采用组织块法和胶原酶消化法体外培养骨质疏松症小鼠脂肪干细胞,并对两种培养方法进行比较分析.方法:切除雌性C57BL/6小鼠双侧卵巢,制作骨质疏松模型,造模成功后取小鼠皮下脂肪组织,分别采用组织块法和胶原酶消化法分离培养脂肪干细胞.应用流式细胞仪检测第3代脂肪干细胞表面特异性抗原;培养7d后,检测细胞产量;检测第3代脂肪干细胞的增殖;检测第4代脂肪干细胞的成脂及成骨分化能力.结果与结论:①组织块法培养第3代细胞CD34、CD146、Sca-1表达率分别为(15.22±1.85)%、(75.55±3.36)%、(83.48±4.22)%,胶原酶消化法第3代细胞CD34、CD146、Sca-1表达率分别为(13.46±2.21)%、(76.62±2.47)%、(84.84±3.56)%;②组织块法每毫克脂肪组织获得的细胞产量高于胶原酶消化法(P<0.05);③培养24 h后,组织块培养法的细胞增殖率高于胶原酶消化法;④两种方法得到的脂肪干细胞均可向脂肪细胞和成骨细胞方向分化,两组间成脂量及成骨量比较差异无显著性意义(P>0.05);⑤结果表明,组织块法比胶原酶消化法更适合体外培养脂肪干细胞,可为骨质疏松症患者自体移植脂肪干细

作者:黄成龙;黎庆;王雷;黄馗;罗道文;肖金刚

来源:中国组织工程研究 2017 年 21卷 29期

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作者:
黄成龙;黎庆;王雷;黄馗;罗道文;肖金刚
来源:
中国组织工程研究 2017 年 21卷 29期
标签:
干细胞 脂肪干细胞 骨质疏松症 组织块培养法 胶原酶消化法 成脂分化 成骨分化 国家自然科学基金
背景:获得充足的脂肪干细胞是自体移植修复骨质疏松症骨缺损的前提,因此如何高效、简便、经济的获得自体原代脂肪干细胞是治疗骨质疏松症的关键.目的:采用组织块法和胶原酶消化法体外培养骨质疏松症小鼠脂肪干细胞,并对两种培养方法进行比较分析.方法:切除雌性C57BL/6小鼠双侧卵巢,制作骨质疏松模型,造模成功后取小鼠皮下脂肪组织,分别采用组织块法和胶原酶消化法分离培养脂肪干细胞.应用流式细胞仪检测第3代脂肪干细胞表面特异性抗原;培养7d后,检测细胞产量;检测第3代脂肪干细胞的增殖;检测第4代脂肪干细胞的成脂及成骨分化能力.结果与结论:①组织块法培养第3代细胞CD34、CD146、Sca-1表达率分别为(15.22±1.85)%、(75.55±3.36)%、(83.48±4.22)%,胶原酶消化法第3代细胞CD34、CD146、Sca-1表达率分别为(13.46±2.21)%、(76.62±2.47)%、(84.84±3.56)%;②组织块法每毫克脂肪组织获得的细胞产量高于胶原酶消化法(P<0.05);③培养24 h后,组织块培养法的细胞增殖率高于胶原酶消化法;④两种方法得到的脂肪干细胞均可向脂肪细胞和成骨细胞方向分化,两组间成脂量及成骨量比较差异无显著性意义(P>0.05);⑤结果表明,组织块法比胶原酶消化法更适合体外培养脂肪干细胞,可为骨质疏松症患者自体移植脂肪干细