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背景:甲状腺癌干细胞是甲状腺癌发生复发转移的关键,白血病抑制因子受体(leukemia inhibitory factor receptor,LIFR)在多种恶性肿瘤中表达下调,且过表达LIFR可抑制恶性肿瘤的复发与转移.目的:探讨LIFR对甲状腺癌干细胞干性维持和体内肺转移能力的影响.方法:收集转移性甲状腺癌患者的肺转移灶,分离培养原代甲状腺癌细胞 TCLM,经无血清悬浮培养形成肿瘤细胞球,流式分选筛选出CD133+表型的转移性甲状腺癌干细胞细胞亚群TCLM-S.将包含LIFR的重组慢病毒过表达质粒及其阴性对照空载体质粒分别以病毒/细胞数量=20的比例感染甲状腺癌干细胞TCLM-S,经2.0 mg/L嘌呤霉素筛选,成功构建稳定表达LIFR或阴性对照的TCLM-SLIFR和TCLM-Scontrol细胞株.qRT-PCR检测LIFR在TCLM-SLIFR和TCLM-Scontrol细胞中的表达,流式细胞术检测TCLM-SLIFR和TCLM-Scontrol细胞中CD133+细胞亚群的比例,Western Blot检测TCLM-SLIFR和TCLM-Scontrol细胞中干性相关因子SOX2、Oct4、Nanog及肿瘤侵袭和转移相关蛋白E-cad、MMP-2、MMP-7的表达.将TCLM-SLIFR和TCLM-Scontrol细胞分别经尾静脉注射到BALB/c裸鼠体内,构建甲状腺癌干细胞裸鼠肺转移模型,观察过表达LIFR对裸鼠体内肺转移能力的影响.结果与结论:与TCLM-Scontrol细胞相比,TCLM-SLIFR细胞中LI

作者:张振华;苏自杰;阚云珍;刘秋雨

来源:中国组织工程研究 2018 年 22卷 9期

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作者:
张振华;苏自杰;阚云珍;刘秋雨
来源:
中国组织工程研究 2018 年 22卷 9期
标签:
干细胞 肿瘤干细胞 甲状腺癌 LIFR CD133+ 肺转移
背景:甲状腺癌干细胞是甲状腺癌发生复发转移的关键,白血病抑制因子受体(leukemia inhibitory factor receptor,LIFR)在多种恶性肿瘤中表达下调,且过表达LIFR可抑制恶性肿瘤的复发与转移.目的:探讨LIFR对甲状腺癌干细胞干性维持和体内肺转移能力的影响.方法:收集转移性甲状腺癌患者的肺转移灶,分离培养原代甲状腺癌细胞 TCLM,经无血清悬浮培养形成肿瘤细胞球,流式分选筛选出CD133+表型的转移性甲状腺癌干细胞细胞亚群TCLM-S.将包含LIFR的重组慢病毒过表达质粒及其阴性对照空载体质粒分别以病毒/细胞数量=20的比例感染甲状腺癌干细胞TCLM-S,经2.0 mg/L嘌呤霉素筛选,成功构建稳定表达LIFR或阴性对照的TCLM-SLIFR和TCLM-Scontrol细胞株.qRT-PCR检测LIFR在TCLM-SLIFR和TCLM-Scontrol细胞中的表达,流式细胞术检测TCLM-SLIFR和TCLM-Scontrol细胞中CD133+细胞亚群的比例,Western Blot检测TCLM-SLIFR和TCLM-Scontrol细胞中干性相关因子SOX2、Oct4、Nanog及肿瘤侵袭和转移相关蛋白E-cad、MMP-2、MMP-7的表达.将TCLM-SLIFR和TCLM-Scontrol细胞分别经尾静脉注射到BALB/c裸鼠体内,构建甲状腺癌干细胞裸鼠肺转移模型,观察过表达LIFR对裸鼠体内肺转移能力的影响.结果与结论:与TCLM-Scontrol细胞相比,TCLM-SLIFR细胞中LI