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背景:研究发现粉防己碱能通过下调β-catenin表达抑制神经胶质瘤干细胞特性,然而其对神经母细胞瘤干细胞的影响未见报道.目的:探讨粉防己碱对神经母细胞瘤干细胞增殖及干性标志物表达的影响,并探究其分子机制.方法:使用无血清悬浮法从神经母细胞瘤SK-N-SH细胞中获取肿瘤干细胞,给予粉防己碱干预,通过MTT法检测粉防己碱对神经母细胞瘤干细胞的增殖抑制作用,细胞免疫荧光染色检测粉防己碱干预后Nestin蛋白水平变化,克隆球形成实验检测粉防己碱干预后肿瘤干细胞成球能力变化,qRT-PCR法检测粉防己碱干预后CD133、Oct-4、Nestin mRNA表达,Western blot检测粉防己碱干预后CD133、Oct-4、Nestin、p-GSK3β和β-catenin蛋白表达.结果与结论:与未干预组比较,粉防己碱干预后SK-N-SH干细胞增殖能力降低(P<0.05),CD133、Oct-4和Nestin mRNA表达降低(P<0.05),Nestin蛋白荧光强度减弱,克隆球形成能力减弱(P<0.05),CD133、Oct-4、Nestin、p-GSK3β和β-catenin蛋白减少(P<0.05).结果表明,粉防己碱抑制神经母细胞瘤干细胞增殖并降低干性标志物表达,可能与其抑制Wnt/β-catenin信号通路有关.

作者:谢东可;何霞;廖凯男

来源:中国组织工程研究 2019 年 23卷 5期

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谢东可;何霞;廖凯男
来源:
中国组织工程研究 2019 年 23卷 5期
标签:
神经母细胞瘤 肿瘤干细胞 粉防己碱 细胞增殖 CD133 Oct-4 Nestin Wnt/β-catenin信号通路
背景:研究发现粉防己碱能通过下调β-catenin表达抑制神经胶质瘤干细胞特性,然而其对神经母细胞瘤干细胞的影响未见报道.目的:探讨粉防己碱对神经母细胞瘤干细胞增殖及干性标志物表达的影响,并探究其分子机制.方法:使用无血清悬浮法从神经母细胞瘤SK-N-SH细胞中获取肿瘤干细胞,给予粉防己碱干预,通过MTT法检测粉防己碱对神经母细胞瘤干细胞的增殖抑制作用,细胞免疫荧光染色检测粉防己碱干预后Nestin蛋白水平变化,克隆球形成实验检测粉防己碱干预后肿瘤干细胞成球能力变化,qRT-PCR法检测粉防己碱干预后CD133、Oct-4、Nestin mRNA表达,Western blot检测粉防己碱干预后CD133、Oct-4、Nestin、p-GSK3β和β-catenin蛋白表达.结果与结论:与未干预组比较,粉防己碱干预后SK-N-SH干细胞增殖能力降低(P<0.05),CD133、Oct-4和Nestin mRNA表达降低(P<0.05),Nestin蛋白荧光强度减弱,克隆球形成能力减弱(P<0.05),CD133、Oct-4、Nestin、p-GSK3β和β-catenin蛋白减少(P<0.05).结果表明,粉防己碱抑制神经母细胞瘤干细胞增殖并降低干性标志物表达,可能与其抑制Wnt/β-catenin信号通路有关.