背景:软骨细胞自噬活性的异常会导致软骨组织退行性病变,引发骨关节炎.近年的研究发现mircoRNA在调控软骨细胞自噬过程中发挥了重要的作用,但其作用的分子机制还不太清楚.目的:探究微小RNA-138-5p(miR-138-5p)对软骨细胞增殖和自噬活性的调节及其作用机制.方法:体外培养SW1353软骨肉瘤细胞系,对照组细胞转染阴性对照miRNA;实验组细胞转染miR-138-5p模拟物.CCK-8法检测细胞增殖活性,荧光定量PCR实验检测基质金属蛋白酶1,3,13的mRNA表达水平;免疫荧光染色法检测LC3蛋白亚细胞定位,用TargetScan7.1在线工具预测miR-138-5p与SIRT1信使RNA(mRNA)的作用位点,用蛋白质免疫印迹实验检测自噬相关蛋白和AMPK信号通路蛋白的表达水平.结果 与结论:①与转染阴性对照的细胞相比,转染miR-138-5p模拟物的细胞增殖活性明显下降,细胞内LC3蛋白点状定位减少,且SIRT1、LC3-11、p-AMPK蛋白表达水平下调,p62蛋白表达水平上升,SIRT1 mRNA的3'UTR区域存在一个保守的miR-138-5p结合位点;②与转染对照miRNA的细胞相比,转染miR-138-5p模拟物的细胞中基质金属蛋白酶1,3和13的mRNA表达均有上升;③结果提示,miR-138-5p调控细胞自噬活性和细胞增殖,其作用机制与SIRT1/AMPK信号通路相关;细胞内上调表达的miR-138-5p会促进软骨细胞基质金属
作者：马泽涛；曾晖；王德利；翁鉴；冯松
来源：中国组织工程研究 2021 年 25卷 5期
