背景:腰椎间盘退变是腰椎间盘突出症的主要病理改变,与椎间盘纤维环细胞的程序性死亡密切相关.既往临床研究表明,通督活血汤治疗腰椎间盘突出症疗效显著,其是否通过抑制椎间盘纤维环细胞焦亡起作用值得深入研究.目的:通过观察通督活血汤含药血清对脂多糖/ATP诱导的椎间盘纤维环细胞焦亡的影响,探讨通督活血汤治疗腰椎间盘突出症的可能作用机制.方法:将36只10周龄SD大鼠以通督活血汤灌胃,连续灌胃7d后腹主动脉取血,制备含药血清.提取4周龄SD大鼠的腰椎间盘,采用机械-酶消化法提取椎间盘纤维环细胞,培养至第2代后采用甲苯胺蓝染色法和Ⅱ型胶原免疫组化染色法进行鉴定.之后将第2代细胞随机分为空白组、模型组、含药血清低、中、高剂量组,除空白组外,其余4组予脂多糖/ATP制造细胞焦亡模型,成模后低、中、高剂量含药血清组分别予5%,10%,20%通督活血汤含药血清干预,空白组不采取任何干预措施.采用MTT法摸索含药血清干预椎间盘纤维环细胞焦亡的最佳干预浓度和最佳干预时间;采用流式细胞术Annexin V FIFT/PI双染测定细胞焦亡率;采用ELISA法检测各组细胞上清液的白细胞介素1β、白细胞介素18的表达量;采用qRT-PCR检测各组半胱氨酸蛋白酶1、Gasdermin D(GSDMD)、NOD样受体蛋白3基因的表达量;采用WesternBlot法检
作者:吴子健;胡昭端;周晓红;李佳;李柏村;蔡国伟;彭锐
来源:中国组织工程研究 2021 年 25卷 14期