背景:骨关节炎是最常见的关节退行性疾病,目前骨髓间充质干细胞已应用于骨关节炎治疗中,但与骨髓间充质干细胞相比,骨髓间充质干细胞来源外泌体移植具有更多优势,例如非免疫原性、非致瘤性以及储存和运输方便.目的:探索骨髓间充质干细胞来源外泌体对骨关节炎的保护作用.方法:①提取SD大鼠骨髓间充质干细胞并通过细胞形态及流式细胞学进行鉴定,利用超速离心法提取细胞上清液中的外泌体并通过透射电镜、粒径及western blot进行鉴定;②提取原代乳鼠肋软骨细胞,与荧光标记外泌体共培养12 h,观察软骨细胞吞噬情况.体外通过白细胞介素1β诱导软骨细胞损伤,加入含有50μg外泌体的PBS溶液100μL干预24 h,采用免疫荧光检测基质金属蛋白酶13及Ⅱ型胶原纤维α1蛋白表达,评估外泌体对于损伤软骨细胞的保护作用;③体内通过碘乙酸诱导大鼠骨关节炎模型,关节腔内注射外泌体,通过苏木精-伊红染色及番红-固绿染色观察骨关节炎关节结构变化,通过免疫组织化学染色检测基质金属蛋白酶13及Ⅱ型胶原纤维α1蛋白表达,评估外泌体对体内软骨损伤的保护作用.结果与结论:①原代骨髓间充质干细胞呈现典型的梭形,放射状排列,表达CD73和CD105而几乎不表达CD45、CD34和CD3;透射电镜显示外泌体呈现典型茶托样形态,粒径小于100 nm,ALIX及HR
作者：凌华军；王其友；林伟文；罗鹏刚
来源：中国组织工程研究 2021 年 25卷 31期
