谷胱甘肽S-转移酶-KGDX融合蛋白的抗血小板作用-临床诊疗知识库

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作者：

查艳萍；秦永文；荆；清；穆瑞斌

来源：

现代临床医学生物工程学杂志 2001 年 7卷 4期

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基因重组表达及纯化大肠杆菌 GPIIb/IIIa 拮抗剂 GST-KGDX融合蛋白抗血小板作用

目的观察重组GST-KGDX(谷胱甘肽S-转移酶-赖-甘-天冬-X)融合蛋白对血小板聚集的抑制作用.方法设计合成了两条编码KGDX(赖-甘-天冬-X)的寡核苷酸链,长度为36个碱基对,两端分别为BamHI酶和XcoI酶切位点.将该基因插入原核高效表达载体PGEX-4T-1的tac启动子下游,获得重组质粒PGEX-4T-1KGDX,转化大肠杆菌DH5a,37℃诱导使重组子表达.采用谷胱甘肽-琼脂糖悬珠亲和层析法获得纯化蛋白.用血小板凝聚仪检测活性.结果 GST-KGDX融合蛋白具有可溶性,产量为35mg/升培养基,表达量占菌体总蛋白48.02

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