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目的克隆S100A2 cDNA、构建S100A2重组表达载体并在肝癌细胞QGY7701中进行表达. 方法应用RT-PCR和DNA重组技术构建绿色荧光蛋白(EGFP)-S100A2融合蛋白表达载体,经脂质体导入QGY7701细胞中进行表达.应用荧光显微镜直接观察EGFP-S100A2融合蛋白的表达情况,G418筛选阳性细胞克隆. 结果构建了带有EGFP的S100A2重组表达载体命名为EGFP-C2-A2,并在肝癌细胞QGY7701中获得了表达.荧光显微镜下可见EGFP-S100A2融合蛋白定位于胞浆及胞核,而pEGFP载体对照之EGFP只定位在胞浆中. 结论 EGFP-S100A2融合蛋白能够在肝癌细胞QGY7701中获得表达,各自在细胞中的定位互不受影响,推断此融合蛋白具有各自的生物学活性.

作者:王秀清;陈亦欣;徐敏;白桦;郑瑾;陈伟;刘红建

来源:现代临床医学生物工程学杂志 2002 年 8卷 4期

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作者:
王秀清;陈亦欣;徐敏;白桦;郑瑾;陈伟;刘红建
来源:
现代临床医学生物工程学杂志 2002 年 8卷 4期
标签:
钙结合蛋白S100A2 肝癌细胞 表达
目的克隆S100A2 cDNA、构建S100A2重组表达载体并在肝癌细胞QGY7701中进行表达. 方法应用RT-PCR和DNA重组技术构建绿色荧光蛋白(EGFP)-S100A2融合蛋白表达载体,经脂质体导入QGY7701细胞中进行表达.应用荧光显微镜直接观察EGFP-S100A2融合蛋白的表达情况,G418筛选阳性细胞克隆. 结果构建了带有EGFP的S100A2重组表达载体命名为EGFP-C2-A2,并在肝癌细胞QGY7701中获得了表达.荧光显微镜下可见EGFP-S100A2融合蛋白定位于胞浆及胞核,而pEGFP载体对照之EGFP只定位在胞浆中. 结论 EGFP-S100A2融合蛋白能够在肝癌细胞QGY7701中获得表达,各自在细胞中的定位互不受影响,推断此融合蛋白具有各自的生物学活性.