建立和检测新型乙型肝炎病毒(HBV)DNA检测技术锁核酸(LNA)捕获TaqMan探针实时聚合酶链反应(PCR)。方法 2009年8月至2010年3月选取本院20例健康献血者和肝病专科住院的75例经COBAS Amplicor检测HBV DNA阳性慢性乙型肝炎(CHB)患者,分别采集血液样本进行LNA捕获TaqMan探针实时PCR特异性试验。同时对LNA-实时PCR方法的重复性、特异性和线性范围等进行分析。结果 其线性范围为10~2.3×109 IU/ml。将10 IU/ml作为检测下限,具有95%可信区间。线性回归分析显示其斜率接近1.0 (R2=0.999)。批内变异值为3.88%~4.36%,批间变异值为8.5%~11.7%。20例健康献血者的阴性对照血清HBV-DNA检测均为阴性,而75例经COBAS Amplicor检测HBV DNA阳性患者的血清样本除1例阴性外,其余都为阳性。结论 LNA捕获TaqMan探针实时PCR方法为HBV-DNA检测的一种快捷灵敏、准确度高的新方法,值得临床实验室推广应用。
作者:余文辉;周大桥;周小梅;李伟雄;张春雷;冯玉丽;贺劲松;陈雪红;林卓玲
来源:中华生物医学工程杂志 2011 年 17卷 3期