目的探讨丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶(MAPK/ERK)特异性抑制剂PD98059对结核杆菌低分子多肽抗原(Mtb?Ag)活化γδΤ细胞的影响。方法分离获取健康人外周血单个核细胞(PBMC),分别使用佛波醇酯+离子霉素(PMA+IM)、Mtb?Ag刺激PBMC,流式细胞术检测处理0、6、12、24、48和72 h后γδΤ细胞CD69的表达。浓度为0、1、10和100μmol/L的PD98059预处理PBMC后再分别加入Mtb?Ag(Mtb?Ag组)、PMA+IM(PMA+IM组)处理24 h,流式细胞术检测活化γδΤ细胞CD69的表达;Mtb?Ag组继续培养10 d后收集细胞计数细胞总数、检测γδΤ细胞比例并计算γδΤ细胞的绝对数量。结果使用PMA+IM处理6 h,γδΤ细胞CD69表达达高峰;使用Mtb?Ag处理24 h,γδΤ细胞CD69表达达高峰。处理后同一时点两组γδΤ细胞CD69表达比较,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。使用终浓度分别为0、1、10和100μmol/L的PD98059预处理PBMC后再分别加入Mtb?Ag、PMA+IM处理24 h,流式细胞术检测显示Mtb?Ag组γδΤ细胞CD69表达分别为(79.0±0.8)
作者:王克强;侯彦强;冉张申;吴家锋;殷殷;魏丽;李清华;李湘奇
来源:中华生物医学工程杂志 2016 年 22卷 4期