目的 探讨机械力诱导氧化应激对人子宫旁韧带成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响.方法 选取2014年1月至10月于本院行阴式全子宫切除术患者10例,术中取切除子宫的子宫旁韧带行成纤维细胞原代培养及鉴定.采用四点弯曲细胞力学加载系统对成纤维细胞进行力学加载构建机械力加载模型.使培养板产生形变位移1 mm的加力大小定义为1 333 μstrain.加力大小分别为0 μstrain(0 mm)、1 333 μtstrain(1 mm)、5 333 μstrain(4 mm),加载频率为0.5 Hz,加载时间为4h.同时采用不同浓度H2O2孵育成纤维细胞构建氧化应激模型.H2O2浓度分别为0、0.2、0.4、0.8和1.6 mmol/L,孵育时间均为4h.采用实时荧光定量PCR和免疫印迹检测两种模型中成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA和蛋白表达,采用细胞免疫荧光检测机械力模型中细胞氧化损伤产物8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)水平变化.结果 机械力加载模型中,实时荧光定量PCR和免疫印迹显示,与对照组(0μstrain)比较,加载1 333 μstrain机械力后成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA和蛋白表达均增加,而加载5 333 μstrain机械力后成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA和蛋白表达均减少(均P＜0.05).细胞免疫荧光检测显示,与对照组(0 μstrain)比较,加载1 333、5 333 μstrain机械力4h后,成纤维细胞内8-OHdG荧光强度明显

作者：汤剑明；洪莉；洪莎莎；刘成；闵洁；胡鸣；赵杨；杨青；李洋；张琦钒

来源：中华生物医学工程杂志 2016 年 22卷 5期