目的探讨β-淀粉样蛋白(amyloid-β protein,Aβ)对胚胎鼠神经干细胞凋亡作用的影响.方法体外培养7d的胚胎鼠神经干细胞,分为正常对照组和实验组,实验组根据Aβ1-40作用终浓度的不同,又分为0.1,1.0,5.0,10.0和20.0μmol/L等5个亚组,分别培养12h、24h、48h及72h.然后经四唑盐实验筛选Aβ1-40致神经干细胞发生凋亡的最佳浓度,再与神经干细胞共同培养.通过Annexin-V磷脂酰丝氨酸荧光标记染色法观察神经干细胞早期凋亡情况;用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)进行染色,观察神经干细胞中晚期凋亡情况.结果(1)经四唑盐筛选实验确定,以终浓度为5.0μmol/L的Aβ1-40作为β-淀粉样蛋白致神经干细胞发生凋亡的最佳诱导剂量.(2)神经干细胞与Aβ1-40(5.0μmol/L)共同培养至6h时,神经干细胞发生早期凋亡,细胞内出现大量绿色荧光标记物,而对照组则未见绿色荧光标记物.(3)神经干细胞与Aβ1-40(5.0μmol/L)共同培养24h时,神经干细胞发生中晚期凋亡,细胞内可见绿色荧光标记物.结论β-淀粉样蛋白可导致胚胎鼠大脑神经干细胞发生凋亡.
作者:苏心;张文治
来源:中国现代神经疾病杂志 2005 年 5卷 4期