目的 研究食管癌中NF-κB通过影响miR-21的表达对食管癌细胞系ET-10凋亡的作用.方法 使用shRNA下调NF-κB p65的表达,使用脂多糖(LPS)激活NF-κB,并使用qRT-PCR检测NF-κB p65的表达情况.使用CCK-8细胞增殖检测试剂盒,检测NF-κB p65对于细胞增殖活力的影响.使用流式细胞术检测NF-κB p65对于ET-10细胞凋亡的影响,使用qRT-PCR检测对于miR21表达的作用,并使用Western blotting检测对于凋亡调控蛋白PTEN以及凋亡执行蛋白cleaved caspase3表达的调控作用.结果 本课题所构建的shRNA载体可显著下调ET-10细胞中NF-κB p65的表达,并显著抑制ET-10细胞的增殖活力,而NF-κB激动剂LPS可以促进ET-10细胞的增殖活力.流式细胞术结果显示(Annexin-V/PI染色法),敲低NF-κB的表达可促进ET-10细胞的凋亡,并促进凋亡执行蛋白cleaved caspase3的表达,而LPS并不影响ET-10细胞的凋亡.进一步试验发现,敲低NF-κB可下调miR-21的表达并抑制PTEN的蛋白表达,而LPS可以促进miR-21以及PTEN蛋白的表达.结论 在ET-10细胞中NF-κB可调控肿瘤细胞的凋亡,下调NF-κB可促进凋亡的发生.NF-κB可能通过miR-21/PTEN信号通路发挥相关作用.
作者:郑天明;梁鸿章;胡蓉;安尼瓦尔·买买提
来源:现代消化及介入诊疗 2022 年 27卷 2期