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目的 建立以特异性荧光探针为特点的Taqman荧光定量RT-PCR方法,对轮状病毒A群核酸进行检测.方法 根据轮状病毒A群基因组保守序列设计引物和探针,建立并分析TaqMan RT-PCR的重复性、特异性、敏感性;以所建立的方法对128例病毒性腹泻患者粪便标本进行检测,同时以基因测序进行验证.结果 所建立的TaqMan RT-PCR检测方法对轮状病毒A群具有很好的特异性和重复性,灵敏度达到101拷贝/μl.128例粪便标本中,轮状病毒A群的检出率为18.0%,与基因测序比对结果相符.结论 构建的轮状病毒A群TaqMan RT-PCR检测方法快速、特异且灵敏,可用于临床病原诊断和流行病学调查.

作者:徐德顺;吴晓芳;纪蕾;朱晓娟;陈莉萍;沈月华

来源:现代预防医学 2015 年 42卷 3期

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作者:
徐德顺;吴晓芳;纪蕾;朱晓娟;陈莉萍;沈月华
来源:
现代预防医学 2015 年 42卷 3期
标签:
TaqMan探针 轮状病毒A群 逆转录聚合酶链反应 TaqMan-based probe Rotavirus group A Reverse transcriptase polymerase Chain reaction
目的 建立以特异性荧光探针为特点的Taqman荧光定量RT-PCR方法,对轮状病毒A群核酸进行检测.方法 根据轮状病毒A群基因组保守序列设计引物和探针,建立并分析TaqMan RT-PCR的重复性、特异性、敏感性;以所建立的方法对128例病毒性腹泻患者粪便标本进行检测,同时以基因测序进行验证.结果 所建立的TaqMan RT-PCR检测方法对轮状病毒A群具有很好的特异性和重复性,灵敏度达到101拷贝/μl.128例粪便标本中,轮状病毒A群的检出率为18.0%,与基因测序比对结果相符.结论 构建的轮状病毒A群TaqMan RT-PCR检测方法快速、特异且灵敏,可用于临床病原诊断和流行病学调查.