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目的 建立一种运用复合探针实时荧光定量PCR技术检测呼吸道合胞病毒(RSV)的方法.方法 根据复合探针技术原理,以其F蛋白基因作为基因靶序列建立检测方法,对引物与探针进行优化与筛选;对检测的灵敏度、特异性、精密度等进行评价,并通过对259例临床标本的检测对本方法的检测效果进行评估.结果 本方法的检测灵敏度RSV A型可达2.0×102 PFU/ml、RSV B型最低可达5.0×102 PFU/ml;与非呼吸道合胞病毒等常见呼吸道病毒均无交叉反应;批间批内变异系数均小于5%;与临床咽拭子标本的检测结果对比表明,该方法与临床诊断结果的符合率为99.23%.结论 该方法建立的荧光定量RT-PCR检测技术能够快速、准确、特异、高灵敏度的对呼吸道合胞病毒核酸进行定性分析,为呼吸道合胞病毒的临床检测提供了新的、更为有效的检测方法.

作者:罗琳;郑胜男;刘琪琦;孙晓彦;王升启;陈苏红

来源:现代预防医学 2015 年 42卷 13期

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作者:
罗琳;郑胜男;刘琪琦;孙晓彦;王升启;陈苏红
来源:
现代预防医学 2015 年 42卷 13期
标签:
呼吸道合胞病毒 复合探针 实时荧光定量RT-PCR Respiratory syncytial virus Complex probe Real time Quantitative RT-PCR
目的 建立一种运用复合探针实时荧光定量PCR技术检测呼吸道合胞病毒(RSV)的方法.方法 根据复合探针技术原理,以其F蛋白基因作为基因靶序列建立检测方法,对引物与探针进行优化与筛选;对检测的灵敏度、特异性、精密度等进行评价,并通过对259例临床标本的检测对本方法的检测效果进行评估.结果 本方法的检测灵敏度RSV A型可达2.0×102 PFU/ml、RSV B型最低可达5.0×102 PFU/ml;与非呼吸道合胞病毒等常见呼吸道病毒均无交叉反应;批间批内变异系数均小于5%;与临床咽拭子标本的检测结果对比表明,该方法与临床诊断结果的符合率为99.23%.结论 该方法建立的荧光定量RT-PCR检测技术能够快速、准确、特异、高灵敏度的对呼吸道合胞病毒核酸进行定性分析,为呼吸道合胞病毒的临床检测提供了新的、更为有效的检测方法.