目的 设计柯萨奇病毒A6(CV-A6)特异性引物,建立稳定可靠的一步法逆转录PCR检测方法.方法 针对CV-A6 VP1基因保守序列,设计特异性引物,建立和优化反应体系和扩增程序.对检测方法的敏感性、特异性进行评估,在临床标本的检测中对其可靠性进行评价.结果 设计的CV-A6特异性引物及建立的逆转录PCR检测方法可成功扩增CV-A6 VP1基因上的特定序列.当引物终浓度为0.3-3.0μM,退火温度为54-60℃时,扩增效果良好.该方法灵敏度达1.17 × 102copies/μl,与其它多种肠道和非肠道病毒无假阳性反应.使用本方法从487份临床标本中检测出CV-A6阳性标本84份,扩增产物电泳条带清晰,测序结果符合.结论 本研究所设计的CV-A6特异性引物及建立的逆转录PCR检测方法具有灵敏度高、特异性强的优点,在对临床标本的检测中稳定可靠.该方法为CV-A6型手足口病的监测和检验提供了新的技术手段.
作者：李洋；张相萍；翟明强；包小兵；宋艳文；宋凤燕
来源：现代预防医学 2016 年 43卷 13期
