目的 探讨Klf4基因对大鼠软骨细胞增殖影响及相关机制.方法 从出生24 h SD幼鼠的股骨头提取软骨细胞,细胞免疫荧光鉴定Col2a1和Sox9基因的表达.转染慢病毒载体PCDH-GFP-Klf4和辅助质粒PSPAX2及PMD2.0G至293ft细胞中产生慢病毒,48 h后收集病毒上清,用其感染大鼠软骨细胞作为Klf4组,用PCDH-GFP慢病毒感染细胞作为对照组.采用CCK8法检测2组细胞生长增殖变化;采用Western blot方法,分别检测2组细胞中Klf4基因表达、增殖相关基因PCNA和CyclinD1蛋白表达、Wnt/β-catenin信号通路上下游基因表达情况.结果 原代培养软骨细胞均强表达Col2a1和Sox9基因.慢病毒PCDH-GFP-Klf4和PCDH-GFP成功感染软骨细胞,Klf4基因在软骨细胞过表达.Klf4组软骨细胞生长明显受到抑制,PCNA和CyclinD1蛋白表达和Wnt/p-catenin信号通路相关基因表达均明显下调.结论 过表达Klf4基因可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路相关分子的表达而抑制软骨细胞增殖.
作者：何旭；薛艳；王学宗；曹月龙；郑昱新；丁道芳
来源：现代中西医结合杂志 2019 年 28卷 34期
