目的:探讨Yes相关蛋白(YAP)在肠上皮屏障损伤中的作用及分子机制。方法:培养人结肠腺癌细胞株Caco-2细胞建立肠上皮屏障模型，分为4组：对照组，正常建好屏障的Caco-2细胞不做任何处理；重组人肿瘤坏死因子(rhTNF)-α组，建好屏障的Caco-2细胞加入rhTNF-α 100 μg/L刺激细胞；Vector+rhTNF-α组，建好屏障的Caco-2细胞先加入对照质粒pcDNA3.1-vector，24 h后加入rhTNF-α 100 μg/L刺激细胞；YAP+rhTNF-α组，建好屏障的Caco-2细胞先加入YAP质粒pcDNA3.1-YAP，24 h后加入rhTNF-α 100 μg/L刺激细胞。通过实时定量PCR和Western blot检测YAP mRNA和蛋白表达，应用跨膜电阻(TEER)和荧光黄透过率检测细胞膜通透性，免疫荧光染色观察细胞骨架蛋白F-actin分布情况。结果:与对照组[(607.3±29.3)Ω·cm
2]相比，rhTNF-α组TEER[(265.3±32.7)Ω·cm
2]明显下降，而YAP+rhTNF-α组TEER[(387.0±18.7)Ω·cm
2]较rhTNF-α组明显升高，差异均有统计学意义(
P<0.001)。荧光黄透过率结果显示，rhTNF-α组(22.7
作者：叶晓琳；吴捷；曹培同；王东伟
来源：中国小儿急救医学 2022 年 29卷 6期
