目的:探讨肺成纤维细胞(PFC)在博来霉素(BLM)致肺纤维化中的作用机制.方法:采用差时贴壁法培养与纯化PFC,传至第3代备用.分为Control组:细胞用正常的培养基培养;BLM组:依次分为0.01mol/L BLM组、0.03mol/L BLM组、0.1mol/L BLM组、1mol/L BLM组及10mol/L BLM,每组每孔细胞分别加上述浓度的BLM,5×104个PFC/孔(12孔板),干预24小时.TGF-β1组:每个孔用2ug/L TGF-β1,5×104个PFC/孔(12孔板),干预24小时.免疫细胞化学法鉴定PFC与肺肌成纤维细胞(PM FC).采用Real-time PCR及Western-blot技术检测Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA及α-SMA mRNA表达与α-SMA蛋白水平.BrdU法检测细胞增殖.结果:BLM可剂量依赖性地抑制细胞增殖,BLM浓度从0.1 mol/L始抑制PFC的增殖较对照组(P＜0.05).0.1mol/L BLM干预24小时后,α-SMA免疫细胞化学染色鉴定呈阳性,α-SMA mRNA的较对照组表达增加(P＜0.05);Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的表达较对照组显著增加(P ＜0.01);0.1mol/L BLM能明显升高α—SMA的蛋白表达水平.结论:PFC转化成PMFC且显著增加Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达,成为BLM诱导肺纤维化中的重要作用机制之一.
作者：何爱明；金美芳；叶瑞洪
来源：心肺血管病杂志 2015 年 34卷 11期
