目的 探讨胃癌标本中Notch1表达与程序性死亡配体1(PD-L1)表达的相关性,并通过体外实验探讨了这种关系在胃癌细胞对T细胞介导的杀伤敏感性中的作用.方法 2020年5月至2021年5月,95例胃癌组织标本(男55例和女40例)取自盘锦辽油宝石花医院和锦州医科大学附属第三医院病理科.采用免疫组织化学方法检测标本中PD-L1和Notch1的表达.体外实验中,采用sgRNA-慢病毒处理敲低MGC-803细胞中Notch1的表达,并分为MGC-803对照组(Con组)或MGC-803 Notch1敲低组(KD组).流式细胞仪细胞分选法(FACS)分析细胞表面PD-L1表达.通过免疫沉淀分析PD-L1和Notch1相互作用,以及PD-L1泛素化情况,免疫荧光测定PD-L1/程序性死亡1(PD-1)结合情况.将慢病毒处理的MGC-803细胞与活化的外周血单个核细胞(PBMC)(1:1)共培养72 h以考察胃癌细胞对T细胞介导的杀伤敏感性.结果 胃癌组织中PD-L1与Notch1表达之间存在高度相关性,PD-L1阳性胃癌组织样本中Notch1高表达的比例高于PD-L1阴性胃癌组织样本(P<0.05).胃癌细胞系中Notch1表达量均高于人胃黏膜细胞(GES-1).KD组细胞中和细胞表面PD-L1表达较Con组细胞显著降低(P<0.05).免疫沉淀证实Notch1与PD-L1可以相互作用并使PD-L1去泛素化.敲低Notch1导致PD-1与MGC-803细胞表面上的PD-1结合降低.与Con组细胞
作者:周春娥;栾梅
来源:消化肿瘤杂志(电子版) 2022 年 14卷 1期