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目的:阐释激活 Shh 信号通路对结肠癌上皮间质表型转化(EMT)的影响。方法常规培养结肠癌细胞株 HT-29细胞,设立对照组(培养液中加入 PBS)、实验组(即信号通路活化,培养液中加入重组 Shh 配体);采用 Westen-blot 检测 E-cadherin 和 Vimentin 蛋白表达水平的变化;RT-PCR 检测上皮间质转化标志物 E-cadherin和 Vimentin 在 mRNA 水平的变化;行 HE 染色观察细胞形态变化的改变。结果Westen-blot 检测蛋白提示,结肠癌 HT-29细胞中,Shh 信号通路激活可促进 Vimentin 蛋白表达(P <0.05),抑制 E-cadherin 蛋白表达(P <0.05);RT-PCR 检测:实验组中 E-cadherin 和 Vimentin 的 mRNA 表达量差异具有统计学意义(P <0.05),与对照组相比较,实验组的 Vimentin 的 mRNA 表达量显著升高(P <0.05),E-cadherin 的表达量明显降低(P <0.05);HE 细胞染色提示对照细胞呈梭形,细胞间更紧密地连接,并与信号通路阻断组细胞无显著差异,而实验组细胞呈椭圆形或圆形,连接疏松,部分细胞呈团簇集群样生长。结论 EMT 在结肠癌转移过程中起着重要的作用,而Shh 信号通路的激活可促进结肠癌细胞 EMT 的发生、发展。

作者:孙亚超;王静东;金博;孙振强;方法;王琦三

来源:新疆医科大学学报 2016 年 39卷 11期

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作者:
孙亚超;王静东;金博;孙振强;方法;王琦三
来源:
新疆医科大学学报 2016 年 39卷 11期
标签:
上皮间质表型转化 Shh 信号通路 结肠癌 E-cadherin 和 Vimentin Epithelial-mesenchymal transition Shh signaling pathway colon cancer E-cadherin and Vimentin
目的:阐释激活 Shh 信号通路对结肠癌上皮间质表型转化(EMT)的影响。方法常规培养结肠癌细胞株 HT-29细胞,设立对照组(培养液中加入 PBS)、实验组(即信号通路活化,培养液中加入重组 Shh 配体);采用 Westen-blot 检测 E-cadherin 和 Vimentin 蛋白表达水平的变化;RT-PCR 检测上皮间质转化标志物 E-cadherin和 Vimentin 在 mRNA 水平的变化;行 HE 染色观察细胞形态变化的改变。结果Westen-blot 检测蛋白提示,结肠癌 HT-29细胞中,Shh 信号通路激活可促进 Vimentin 蛋白表达(P <0.05),抑制 E-cadherin 蛋白表达(P <0.05);RT-PCR 检测:实验组中 E-cadherin 和 Vimentin 的 mRNA 表达量差异具有统计学意义(P <0.05),与对照组相比较,实验组的 Vimentin 的 mRNA 表达量显著升高(P <0.05),E-cadherin 的表达量明显降低(P <0.05);HE 细胞染色提示对照细胞呈梭形,细胞间更紧密地连接,并与信号通路阻断组细胞无显著差异,而实验组细胞呈椭圆形或圆形,连接疏松,部分细胞呈团簇集群样生长。结论 EMT 在结肠癌转移过程中起着重要的作用,而Shh 信号通路的激活可促进结肠癌细胞 EMT 的发生、发展。