目的 对比婴幼儿血管瘤内皮细胞(HemEC)与普通的脐静脉内皮细胞(HUVEC)中PI3K/Akt信号通路活化状态,探讨其对HemEC凋亡的影响与机制.方法 无血清培养环境下诱导血管内皮细胞凋亡.应用Annexin V/PI双染流式细胞仪术、Hoechst33342与TUNEL荧光染色检测观察细胞凋亡的状态.采用Western blot技术检测VEGF、Akt与磷酸化Akt在HemEC和HUVEC中的表达或活化状态.应用PI3K抑制剂LY294002处理血清饥饿的血管内皮细胞,观察其对细胞凋亡的影响.结果 无血清培养12h后,可见HUVEC凋亡明显较对照组增多(P＜0.05)；,而HemEC凋亡增多不明显(P＞0.05).无血清培养24 h或48 h后,HemEC中出现增多的凋亡细胞,但显著低于HUVEC(P＜0.05).Western blot检测发现,与HUVEC相比,HemEC中Akt的活性显著升高.使用LY294002抑制HemEC中PI3K/Akt的活性后,HemEC凋亡率显著升高(P＜0.05),而LY294002对HUVEC凋亡的影响不明显(P＞0.05).结论 在离体细胞实验条件下,异常活化的PI3K/Akt信号通路能显著抑制缺血环境下的HemEC发生自发性凋亡.
作者：吉毅；陈思源；李凯；肖现民；郑珊；徐挺
来源：中华小儿外科杂志 2014 年 35卷 2期
