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目的 检测miR-34a在原发性和转移性神经母细胞瘤组织中的表达水平,并探讨miR-34a对神经母细胞瘤细胞生长、侵袭和迁移的影响.方法 收集18例神经母细胞瘤患儿(神经母细胞瘤原发部位以及转移部位),利用实时定量PCR检测miR-34a在原发性和转移性神经母细胞瘤组织中的表达水平.在神经母细胞瘤细胞中瞬时转染miR-34a mimics,利用平板克隆形成实验、MTT、侵袭实验和体外划痕实验检测miR-34a对细胞生长、侵袭和迁移的影响.最后利用Western印迹检测miR-34a对生长以及侵袭迁移相关蛋白表达水平的影响.结果 与原发性神经母细胞瘤组织相比,miR-34a在转移性神经母细胞瘤组织中表达降低.与对照细胞组相比,转染miR-34a mimics的细胞克隆数目降低(SH-SY5Y:24±3.07比43±6.29和IMR-32:17±2.36比37±5.41),细胞活性下降,并且细胞侵袭和迁移能力也降低(差异具有统计学意义).Western结果显示miR-34a抑制CD44、CDK4、CCND1和CCNE2的蛋白水平.结论 miR-34a分别通过降低CD44、CDK4、CCND1和CCNE2的表达水平,而抑制神经母细胞瘤细胞的生长、侵袭和迁移,发挥着肿瘤抑癌基因的作用,提示miR-34a可能作为神经母细胞瘤分子治疗的靶点.

作者:潘敏;陈鑫;张虹;韩芦芦;鹿洪亭;郝希伟;董蒨

来源:中华小儿外科杂志 2014 年 35卷 5期

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作者:
潘敏;陈鑫;张虹;韩芦芦;鹿洪亭;郝希伟;董蒨
来源:
中华小儿外科杂志 2014 年 35卷 5期
标签:
微RNAs 神经母细胞瘤 肿瘤转移 microRNAs Neuroblastoma Neoplasm metastasis
目的 检测miR-34a在原发性和转移性神经母细胞瘤组织中的表达水平,并探讨miR-34a对神经母细胞瘤细胞生长、侵袭和迁移的影响.方法 收集18例神经母细胞瘤患儿(神经母细胞瘤原发部位以及转移部位),利用实时定量PCR检测miR-34a在原发性和转移性神经母细胞瘤组织中的表达水平.在神经母细胞瘤细胞中瞬时转染miR-34a mimics,利用平板克隆形成实验、MTT、侵袭实验和体外划痕实验检测miR-34a对细胞生长、侵袭和迁移的影响.最后利用Western印迹检测miR-34a对生长以及侵袭迁移相关蛋白表达水平的影响.结果 与原发性神经母细胞瘤组织相比,miR-34a在转移性神经母细胞瘤组织中表达降低.与对照细胞组相比,转染miR-34a mimics的细胞克隆数目降低(SH-SY5Y:24±3.07比43±6.29和IMR-32:17±2.36比37±5.41),细胞活性下降,并且细胞侵袭和迁移能力也降低(差异具有统计学意义).Western结果显示miR-34a抑制CD44、CDK4、CCND1和CCNE2的蛋白水平.结论 miR-34a分别通过降低CD44、CDK4、CCND1和CCNE2的表达水平,而抑制神经母细胞瘤细胞的生长、侵袭和迁移,发挥着肿瘤抑癌基因的作用,提示miR-34a可能作为神经母细胞瘤分子治疗的靶点.