目的 神经调节素1(neuregulin 1,NRG1)可能是先天性巨结肠症的易感基因,本实验选用斑马鱼为模式生物探讨NRG1在肠神经系统发育中的作用.方法 克隆斑马鱼NRG1基因,分析多物种NRG1同源性及进化程度;使用原位杂交技术检测NRG1在成年斑马鱼肠道及斑马鱼胚胎中的表达;通过显微注射吗啉代反义寡核苷酸建立斑马鱼NRG1敲低模型,使用原位杂交及免疫荧光技术对比观察斑马鱼表型、肠神经元分化及迁移情况.结果 NRG1进化较保守,斑马鱼NRG1与人类NRG1基因有较高同源性;在成年斑马鱼肠道中,NRG1主要位于黏膜层,在肌层和浆膜层均未见表达;胚胎中,NRG1自胚胎早期即开始表达,并表达于胚胎及幼体的肠道,表达谱与肠神经发育时相及位置相符;敲低NRG1后,胚胎出现孵出延迟,头部畸形,身体变短,躯体扭曲等表型;注射NRG1-MO后胚胎存活率为29.0％(196/677),较对照组87.5％(446/510)低;注射NRG1-MO后胚胎异常表型率为21.5％(40/186),较对照组5.5％(23/415)高;敲低NRG1后分化的肠神经元计数(3.33±1.53)个,较对照组(43.00±13.23)个少,而且肠神经元从头端至尾端的迁移过程受阻.结论 使用斑马鱼这一模式动物研究NRG1在肠神经发育中的作用,可以间接反映NRG1在人类先天性巨结肠症中的作用,NRG1可能参与斑马鱼肠神经系统发育过程.
作者：普佳睿；汤绍涛；童强松；王国斌；贾海波；杨俊
来源：中华小儿外科杂志 2015 年 36卷 9期
