目的 研究Shh/Bmp4信号通路基因甲基化修饰对肛门直肠畸形(anorectal malforma-tion,ARM)胎鼠末端直肠神经系统(enteric nervous system,ENS)发育的影响.方法 SD孕鼠15只,按照数字表法随机分成模型组(ET U)、干预组(ET U+5-azaC)与正常组(NC).孕10 d,ET U组和ET U+5-azaC组均经胃管注入乙烯硫脲,ET U+5-azaC组同时腹腔注射5-azaC(3 mg/kg).孕20 d,剖宫取子鼠.观察ARM发生率,用PCR、免疫组化和Western blot等方法检测子鼠末端直肠组织中DNA甲基转移酶(DNM T1、DNM T3a、DNM T3b)含量及活性、Shh基因启动子区甲基化状态及Shh/Bmp4信号通路关键组分的表达水平.结果 ①ETU组和ETU+5-azaC组的ARM发生率分别为98.3％ 、64.9％,两组之间差异有统计学意义(P<0.0001);②ET U组和ET U+5-azaC组末端直肠组织中DNMT1、DNMT3a、DNMT3b的表达水平较对照组均明显升高(P<0.01);ETU组DNMT1、DNMT3a的表达水平较ETU+5-azaC组明显升高(P<0.01),而两组DNMT3b表达水平未发现明显差异;③ET U组末端直肠组织中Shh启动子区甲基化水平明显高于ET U+5-azaC组和对照组(P<0.05),ETU+5-azaC组亦较对照组明显升高(P=0.05);④ETU组和ETU+5-azaC组末端直肠组织中Shh和Bmp4表达水平较对照组均明显降低(P<0.0001),同时ETU组较ETU+5-azaC组间

作者：周莹；杨一凡；董瑞；黄焱磊

来源：中华小儿外科杂志 2019 年 40卷 11期