目的构建表达单纯疱疹病毒1型糖蛋白D的DNA疫苗.方法采用聚合酶链式反应(PCR),从HSV-1基因组中扩增出gD基因,插入中间载体pGEM-T,然后克隆入真核表达载体pcDNA3.1, 构建重组质粒pLy-D.经部分测序和限制性内切酶分析证实.将pLy-D转染Cos-7细胞,并肌肉接种ICR小鼠.用免疫组化和ELISA方法分别检测gD蛋白表达及小鼠血清中的特异性抗体.结果转染的Cos-7细胞中有gD蛋白的表达;经三次肌肉免疫接种的小鼠血清中有特异性HSV-1抗体产生.结论本研究构建的重组质粒pLy-D能够在哺乳动物细胞中表达目的蛋白,免疫接种后可以诱导动物产生免疫反应.
作者：李建国；袁育康；冯捷；徐汉卿；史霖
来源：新乡医学院学报 2002 年 19卷 3期
