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目的 探讨死亡受体通路在岩大戟内酯B诱导的耐阿霉素白血病细胞株HL-60/ADR细胞凋亡中的作用.方法 采用Annexin Ⅴ异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(FITC/PI)双染流式细胞术检测HL-60/ADR细胞凋亡;利用Western blot检测Fas/FasL蛋白的表达;采用荧光比色法测定细胞内caspase-8和caspase-3蛋白酶活性.结果 HL-60/ADR细胞的凋亡率随着岩大戟内酯B浓度的增加及作用时间的延长而逐渐增加.当岩大戟内酯B浓度为40 mg·L-1时,作用24、48及72 h后早期凋亡率和总凋亡率与0h比较,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.001);当浓度为20、40、80 mg·L-1时,作用48 h后早期凋亡率和总凋亡率与0 mg·L-1比较,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.001).Fas/FasL蛋白的表达随着岩大戟内酯B作用时间的延长逐渐增加;caspase-8和caspase-3蛋白酶的活性亦逐渐增加.作用24、48及72 h后caspase-3和caspase-8蛋白酶活性与0h比较,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.001).结论 岩大戟内酯B能够诱导耐阿霉素白血病细胞株HL-60/ADR细胞凋亡,Fas/FasL通路参与了岩大戟内酯B诱导的HL-60/ADR细胞凋亡过程.

作者:白雪;赵鹤;何平

来源:新乡医学院学报 2014 年 31卷 12期

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作者:
白雪;赵鹤;何平
来源:
新乡医学院学报 2014 年 31卷 12期
标签:
岩大戟内酯B HL-60/ADR细胞 细胞凋亡 Jolkinolide B HL-60/ADR apoptosis
目的 探讨死亡受体通路在岩大戟内酯B诱导的耐阿霉素白血病细胞株HL-60/ADR细胞凋亡中的作用.方法 采用Annexin Ⅴ异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(FITC/PI)双染流式细胞术检测HL-60/ADR细胞凋亡;利用Western blot检测Fas/FasL蛋白的表达;采用荧光比色法测定细胞内caspase-8和caspase-3蛋白酶活性.结果 HL-60/ADR细胞的凋亡率随着岩大戟内酯B浓度的增加及作用时间的延长而逐渐增加.当岩大戟内酯B浓度为40 mg·L-1时,作用24、48及72 h后早期凋亡率和总凋亡率与0h比较,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.001);当浓度为20、40、80 mg·L-1时,作用48 h后早期凋亡率和总凋亡率与0 mg·L-1比较,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.001).Fas/FasL蛋白的表达随着岩大戟内酯B作用时间的延长逐渐增加;caspase-8和caspase-3蛋白酶的活性亦逐渐增加.作用24、48及72 h后caspase-3和caspase-8蛋白酶活性与0h比较,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.001).结论 岩大戟内酯B能够诱导耐阿霉素白血病细胞株HL-60/ADR细胞凋亡,Fas/FasL通路参与了岩大戟内酯B诱导的HL-60/ADR细胞凋亡过程.