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目的 将精神分裂症患者来源的人皮肤成纤维细胞(HDF)重编程为诱导性多潜能干细胞(iPSCs),为精神分裂症患者建立iPSCs模型.方法 采用聚合酶链反应技术从pEP4EO2SEM2K质粒上扩增2条目的片段:OCT4-IRES2-SOX2和C-MYC-IRES2-KLF4,将其连接到慢病毒载体pLVX-IRES-mCherry上.构建成功的质粒通过磷酸钙转染法转染293T细胞包装病毒,检测病毒活力后侵染患者皮肤成纤维细胞,将其去分化为诱导性多潜能干细胞,并检测其多能性.结果 测序表明重组慢病毒载体构建成功,并制备了具有良好侵染活力的重组慢病毒.将含4种重编程因子的慢病毒颗粒侵染1例精神分裂症患者的HDF后,HDF的形态逐步发生变化,最终形成典型的iPSCs克隆.结论 成功将1例精神分裂症患者成纤维细胞重编程为iPSCs,为以后建立更多精神分裂症疾病模型奠定基础.

作者:任佩佩;樊晋宇;郭鑫鑫;原志庆;林俊堂;丰慧根

来源:新乡医学院学报 2016 年 33卷 7期

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作者:
任佩佩;樊晋宇;郭鑫鑫;原志庆;林俊堂;丰慧根
来源:
新乡医学院学报 2016 年 33卷 7期
标签:
诱导性多潜能干细胞 精神分裂症 人皮肤成纤维细胞 细胞模型 induced pluripotent stem cells schizophrenia human dermal fibroblasts cell model
目的 将精神分裂症患者来源的人皮肤成纤维细胞(HDF)重编程为诱导性多潜能干细胞(iPSCs),为精神分裂症患者建立iPSCs模型.方法 采用聚合酶链反应技术从pEP4EO2SEM2K质粒上扩增2条目的片段:OCT4-IRES2-SOX2和C-MYC-IRES2-KLF4,将其连接到慢病毒载体pLVX-IRES-mCherry上.构建成功的质粒通过磷酸钙转染法转染293T细胞包装病毒,检测病毒活力后侵染患者皮肤成纤维细胞,将其去分化为诱导性多潜能干细胞,并检测其多能性.结果 测序表明重组慢病毒载体构建成功,并制备了具有良好侵染活力的重组慢病毒.将含4种重编程因子的慢病毒颗粒侵染1例精神分裂症患者的HDF后,HDF的形态逐步发生变化,最终形成典型的iPSCs克隆.结论 成功将1例精神分裂症患者成纤维细胞重编程为iPSCs,为以后建立更多精神分裂症疾病模型奠定基础.