目的 观察三磷腺苷(ATP)诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞内Ca2+水平变化的特点,并探讨P2X7受体阻断剂对其的影响.方法 取对数生长期的SH-SY5Y细胞接种于含体积分数10％胎牛血清高糖达尔伯克改良伊格尔培养基(DMEM)中,在37℃、体积分数5％ CO2培养箱中培养24 h,随机分为4组,分别加入含0、1、3、5 mmol·L-1ATP的培养液,每孔100 μL,各组均分别作用15、30、60 min,然后用Hank's溶液洗涤细胞3次,Fluo-3/AM染细胞内Ca2+,Hoechst 33258染细胞核.荧光显微镜下观察细胞内荧光发射强度.另取对数生长期的SH-SY5Y细胞悬液接种于含体积分数10％胎牛血清高糖DMEM的96孔板中,在37℃、体积分数5％ CO2培养箱中培养24h,随机分为正常对照组、ATP组及KN-62低、中、高剂量组,正常对照组细胞在每孔100 μL培养液中常规培养,ATP组细胞在每孔100 μL含5 mmol·L-1 ATP的培养液中培养,KN-62低、中、高剂量组细胞分别每孔先用100 μL含100、500、1 000 nmol·L-1 KN-62的培养液孵育30 min,每孔再用100 μL的5mmol·L-1 ATP培养液处理1h,用Hank's溶液洗涤细胞3次,Fluro-3/AM染色细胞内Ca2,Hoechst 33258染色细胞核.荧光显微镜下观察细胞内荧光发射强度变化,图像分析软件记录结果,测每组细胞中Ca2+的平均荧光强度.每次实验每组设3

作者：李秀娟；王国红；张利彬；杨坤丽；李超堃；王璐；宋景贵；赵红岗；李东亮

来源：新乡医学院学报 2017 年 34卷 7期