目的 探讨微RNA(miR)-133a-3p靶向调控转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad3对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖和凋亡的影响及机制.方法 选择2020年2月至2021年2月焦作市人民医院皮肤科收治的瘢痕疙瘩患者29例为研究对象,手术切取瘢痕疙瘩组织及其周围正常皮肤组织,分离培养瘢痕疙瘩成纤维细胞(KF)和正常皮肤组织成纤维细胞(NF).取对数生长期KF细胞,随机分为空白对照组、miR-阴性对照(NC)组、miR-133a-3p组、miR-133a-3p+pcDNA3.1组、miR-133a-3p+pcDNA3.1-TGF-β1组;空白对照组细胞不做任何转染,miR-NC组细胞转染miR-NC,miR-133a-3p组细胞转染miR-133a-3p mimic,miR-133a-3p+pcDNA3.1组细胞共转染miR-133a-3p mimic和pcDNA3.1,miR-133a-3p+pcDNA3.1-TGF-β1组细胞共转染miR-133a-3p mimic和pcDNA3.1-TGF-β1.实时荧光定量聚合酶链反应法检测组织和细胞中miR-133a-3p和Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ)、Ⅲ型胶原蛋白(collagenⅢ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA的表达,细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖活力,流式细胞术检测细胞凋亡情况.应用TargetScan数据库通过生物信息分析预测miR-133a-3p与TGF-β1的3'非翻译区(3'-UTR)存在结合位点,构建含有预测结合位点的野生型(Wt)和突变型(Mt)TGF-β13'-UTR片段的荧光素酶报告

作者：卫艳萍；谢彤阳；王廷廷；张宁宁

来源：新乡医学院学报 2022 年 39卷 4期