目的:探讨晚期糖基化终产物(AGEs)对大鼠肾小球内皮细胞(rGEnC)通透性的影响及线粒体功能障碍在其中的作用。方法采用原代培养的 rGEnC,予 AGEs 80 mg/L 作用24 h,采用跨内皮细胞电阻抗和异硫氰酸荧光素标记的牛血清白蛋白滤过率观察通透性的变化,MitoSOX 试剂盒检测细胞内活性氧,JC-1荧光标记法检测线粒体膜电位(△Ψm),荧光素酶检测系统测定三磷酸腺苷(ATP)的生成,蛋白免疫印迹法检测 NF-E2相关因子2(Nrf2)的表达。结果AGEs 可引起 rGEnC 通透性升高,活性氧产生增加,采用叔丁基对苯二酚(tBHQ)(20μmol/L)、N-乙酰半胱氨酸(NAC)(10 mmol/L)和抗 AGE 受体抗体(100 mg/L)预处理后,上述 AGEs 作用被抑制。AGEs 可引起 rGEnC △Ψm 下降,ATP 和 Nrf2减少,而 anti-RAGE 抗体可抑制△Ψm 下降和 ATP 减少, tBHQ 则能抑制△Ψm 下降和 Nrf2减少。结论AGEs 可导致 rGEnC 线粒体功能障碍,引起活性氧产生增加,从而导致 rGEnC 间通透性增加。
作者:唐骅;李灿明;赖渭妍;饶嘉玲;叶增纯;娄探奇
来源:新医学 2015 年 3期