目的：明确miRNA-200b是否通过调控靶向血管内皮生长因子（VEGF）的表达而抑制视网膜母细胞瘤细胞的生长与侵袭，进一步揭示 miRNA-200b 抗肿瘤的分子机制。方法将视网膜母细胞瘤 Y79细胞分成6组：miRNA-200b、miRNA-NC、sh-VEGF、shRNA-NC、miRNA-200b ＋sh-VEGF、miRNA-NC ＋shRNA-NC 组。荧光素酶报告系统检测 miR-200b 对 VEGF 的3'-非翻译区荧光素酶活性的影响；蛋白免疫印迹法检测 sh-VEGF 转染的干扰效果；MTS 实验与 Transwell 侵袭实验分别检测上述各组对视网膜母细胞瘤细胞增殖与侵袭的影响。结果荧光素酶报告检测结果显示，miR-200b 能特异性地与 VEGF 的3'-非翻译区结合，并抑制其荧光素酶的活性；蛋白免疫印迹法显示，sh-VEGF 转染组中 VEGF 的蛋白表达水平较对照组明显下调；MTS 实验结果显示，转染 miRNA-200b 组与 sh-VEGF 组48 h 后视网膜母细胞瘤细胞的生存率均低于各自对照组（P 均＜0．05）；而共转染 miR-NA-200b ＋sh-VEGF 组48 h 后视网膜母细胞瘤细胞的生存率低于对照组、miRNA-200b 组、sh-VEGF组（F ＝9．887，P 均＜0．05）；Transwell 侵袭实验显示，转染 miRNA-200b 组与 sh-VEGF 组48 h 后视网膜母细胞瘤细胞的穿膜能力均低于各自对照组（P 均＜0．05）；而共转染 miRNA-2

作者：刘越峰；罗卫民；张勇；钟晓东

来源：新医学 2016 年 47卷 8期