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目的:探讨过表达 B 和 T 淋巴细胞衰减子(BTLA)的树突状细胞(DC)对 C57BL/6小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)免疫反应的调节作用。方法构建携带目的基因 BTLA 的重组慢病毒载体,以感染复数15转染原代分离培养的 C57BL/6小鼠骨髓源性的 DC 从而在 DC 上过表达 BTLA。构建 C57BL/6小鼠 EAE 模型,发病高峰时分离脾细胞并从中磁珠分选出 CD4+T 淋巴细胞并与过表达 BTLA 的 DC 共培养,以 ELISA 法检测共培养体系中辅助性 T 淋巴细胞 Th1类细胞因子干扰素-γ和 Th2类细胞因子 IL-10的含量。结果成功构建携带 BTLA 基因的重组慢病毒 LPP-Mm26645-Lv203-400,以感染复数15转染培养5 d 后的 DC,96 h 后 DC 上有 BTLA 过表达。采用 MOG35-55多肽免疫 C57BL/6小鼠后,21~24 d 出现发病高峰,分选出的 CD4+T 淋巴细胞与过表达 BTLA 的 DC共培养72 h,ELISA 法检测共培养体系中干扰素-γ分泌明显减少,IL-10分泌明显增多(P 均<0.05)。结论过表达 BTLA 可以增强 DC 的耐受性,通过逆转 Th1/Th2失衡,对 EAE 产生特异性抗原免疫耐受,负性调节 EAE 的免疫反应。

作者:王萱;易寰;徐莉;刘佳;李敏;彭福华

来源:新医学 2017 年 48卷 2期

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作者:
王萱;易寰;徐莉;刘佳;李敏;彭福华
来源:
新医学 2017 年 48卷 2期
标签:
B 和 T 淋巴细胞衰减子 树突状细胞 实验性自身免疫性脑脊髓炎 免疫耐受 B-and T-lymphocyte attenuator Dendritic cell Experimental autoimmune encephalomyelitis Immune tolerance
目的:探讨过表达 B 和 T 淋巴细胞衰减子(BTLA)的树突状细胞(DC)对 C57BL/6小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)免疫反应的调节作用。方法构建携带目的基因 BTLA 的重组慢病毒载体,以感染复数15转染原代分离培养的 C57BL/6小鼠骨髓源性的 DC 从而在 DC 上过表达 BTLA。构建 C57BL/6小鼠 EAE 模型,发病高峰时分离脾细胞并从中磁珠分选出 CD4+T 淋巴细胞并与过表达 BTLA 的 DC 共培养,以 ELISA 法检测共培养体系中辅助性 T 淋巴细胞 Th1类细胞因子干扰素-γ和 Th2类细胞因子 IL-10的含量。结果成功构建携带 BTLA 基因的重组慢病毒 LPP-Mm26645-Lv203-400,以感染复数15转染培养5 d 后的 DC,96 h 后 DC 上有 BTLA 过表达。采用 MOG35-55多肽免疫 C57BL/6小鼠后,21~24 d 出现发病高峰,分选出的 CD4+T 淋巴细胞与过表达 BTLA 的 DC共培养72 h,ELISA 法检测共培养体系中干扰素-γ分泌明显减少,IL-10分泌明显增多(P 均<0.05)。结论过表达 BTLA 可以增强 DC 的耐受性,通过逆转 Th1/Th2失衡,对 EAE 产生特异性抗原免疫耐受,负性调节 EAE 的免疫反应。