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目的 探讨提高人端粒酶逆转录酶基因(hTERT)转染原代培养乳鼠心肌细胞效率的有效方法.方法 通过测量悬浮心肌细胞的半径,估计电击穿时临界电压的范围.以钙黄素为报告分子,确定最佳可逆性电击穿时电压范围.进而用pAdtrack-GFP-hTERT对乳鼠心肌细胞进行转染,并通过绿色荧光蛋白(GFP)的表达比较电穿孔、Lipofectamine 2000和Top Easy 3种转染方法对hTERT的转染效率.结果 电压170~200 V,波宽2 ms左右,间隔125 ms,脉冲4~6个时,pAdTrack-GFP-hTERT可有效转染乳鼠心肌细胞,转染率高达7.5

作者:冯建启;余细勇

来源:徐州医学院学报 2007 年 27卷 10期

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作者:
冯建启;余细勇
来源:
徐州医学院学报 2007 年 27卷 10期
标签:
电穿孔法 人端粒酶逆转录酶基因 基因转染 心肌细胞
目的 探讨提高人端粒酶逆转录酶基因(hTERT)转染原代培养乳鼠心肌细胞效率的有效方法.方法 通过测量悬浮心肌细胞的半径,估计电击穿时临界电压的范围.以钙黄素为报告分子,确定最佳可逆性电击穿时电压范围.进而用pAdtrack-GFP-hTERT对乳鼠心肌细胞进行转染,并通过绿色荧光蛋白(GFP)的表达比较电穿孔、Lipofectamine 2000和Top Easy 3种转染方法对hTERT的转染效率.结果 电压170~200 V,波宽2 ms左右,间隔125 ms,脉冲4~6个时,pAdTrack-GFP-hTERT可有效转染乳鼠心肌细胞,转染率高达7.5