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目的 建立SD大鼠星形胶质细胞(astrocyte,AC)缺氧/复氧损伤模型,探讨JNK信号转导通路与星形胶质细胞损伤的关系.方法 体外培养新生SD大鼠星形胶质细胞,传至第3代,细胞自然纯化,实验设正常对照组(N)、SP600125组(SP组,10 μmol /L)、缺氧/复氧组(H/R组)和缺氧/复氧+SP600125组(H/R+SP组).分别利用MTT法、AnnexinV/碘化丙啶(propidium iodide,PI)双染法、WB法检测缺氧8 h,复氧4、6、12、24 h时细胞存活率、凋亡率、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、磷酸化JNK(p-JNK)的变化.结果 ①缺氧/复氧后细胞活力出现明显下降,SP600125阻断JNK通路后细胞活力高于H/R组;②缺氧/复氧后细胞凋亡率增加,SP600125阻断JNK通路后能够减轻细胞凋亡.③各组AC的JNK水平无显著变化,缺氧/复氧干预后p-JNK表达上调,用SP600125阻断JNK通路后,H/R+SP组较H/R组p-JNK水平降低.结论 JNK信号通路参与了星形胶质细胞缺氧/复氧损伤过程.

作者:李海亮;许鹏程;董瑞国

来源:徐州医学院学报 2013 年 33卷 8期

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李海亮;许鹏程;董瑞国
来源:
徐州医学院学报 2013 年 33卷 8期
标签:
星形胶质细胞 JNK 缺氧复氧
目的 建立SD大鼠星形胶质细胞(astrocyte,AC)缺氧/复氧损伤模型,探讨JNK信号转导通路与星形胶质细胞损伤的关系.方法 体外培养新生SD大鼠星形胶质细胞,传至第3代,细胞自然纯化,实验设正常对照组(N)、SP600125组(SP组,10 μmol /L)、缺氧/复氧组(H/R组)和缺氧/复氧+SP600125组(H/R+SP组).分别利用MTT法、AnnexinV/碘化丙啶(propidium iodide,PI)双染法、WB法检测缺氧8 h,复氧4、6、12、24 h时细胞存活率、凋亡率、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、磷酸化JNK(p-JNK)的变化.结果 ①缺氧/复氧后细胞活力出现明显下降,SP600125阻断JNK通路后细胞活力高于H/R组;②缺氧/复氧后细胞凋亡率增加,SP600125阻断JNK通路后能够减轻细胞凋亡.③各组AC的JNK水平无显著变化,缺氧/复氧干预后p-JNK表达上调,用SP600125阻断JNK通路后,H/R+SP组较H/R组p-JNK水平降低.结论 JNK信号通路参与了星形胶质细胞缺氧/复氧损伤过程.