目的 通过体外培养原代心房肌细胞,快速电刺激模拟心房颤动(房颤)模型,筛选、分析与房颤电重构机制中相关的microRNA (miRNA)表达.方法 采用胰酶与Ⅰ型胶原酶双酶法及差速贴壁法分离培养乳鼠心房肌细胞,α-横纹肌肌动蛋白抗体免疫荧光鉴定.乳鼠心房肌细胞在频率为4 Hz、电压为15 V、脉冲为5 ms的快速电场刺激中培养24h模拟心房肌细胞房颤模型.心房肌细胞随机分为对照组、房颤组,提取各组RNA,运用实时荧光定量PCR(qPCR) TaqMan探针法检测房颤电重构机制中相关miRNA的差异性表达.结果 与对照组相比,房颤组miR-101a、miR-101b、miR-26a、miR-26b表达显著下调(P<0.01),miR-21、miR-328、miR-499表达显著上调(P<0.01),而miR-1表达略有下调,但与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05).结论 房颤电重构机制相关miRNA存在表达性差异,其中miR-101a、miR-101b、miR-26a、miR-26b低表达,miR-21、miR-328、miR-499高表达,它们有可能成为早期预警诊断房颤的生物学标志物,并有可能成为未来治疗房颤的干预靶点.
作者:李艳茹;张琼;瞿晓雅;张少利;王鲁静;李道远;张松;沈冰冰;曹希传
来源:徐州医学院学报 2016 年 36卷 5期