目的 建立一种快速简便的不经过消化酶处理而直接分离、纯化新鲜肾癌组织浸润淋巴细胞的新方法.方法 手术切除的新鲜肾癌组织经过机械剪碎、温和匀浆处理制备成单细胞悬液,再通过Ficoll密度梯度离心分离肿瘤浸润淋巴细胞,密度梯度分离后经CD3磁珠分选纯化.结果 成功建立了快速从新鲜肾癌组织分离肿瘤浸润淋巴细胞的新方法,成功完成7例组织分离.分析结果显示CD3+T细胞占(24.10±17.60)%,CD4+和CD8+细胞分别占(37.69 ±9.83)%、(37.86±10.47)%;进一步经磁珠纯化后CD3+T细胞纯度达91.6%,适用于后续分析.结论 本法优势在于:①与酶消化法相比,有利于保护细胞膜表面受体,最大程度全面反映肿瘤组织中淋巴细胞亚群的浸润情况;②短暂、快速、温和匀浆处理,操作时间短,有利于维持细胞的高活力.
作者:李慧忠;王刚;韩露露;李海龙;李节;张青;李阳;郑骏年
来源:徐州医学院学报 2017 年 37卷 2期