目的 探讨Nod样受体蛋白3 (NLRP3)在大鼠原代皮质神经元坏死样凋亡中的表达情况.方法 SD大鼠原代皮质神经元细胞培养12天,Q-VD-Oph预处理30 min后缺糖缺氧刺激诱导坏死样凋亡.①将细胞分为正常对照组、缺糖缺氧组(缺糖缺氧2 h,复氧12 h)、实验组(缺糖缺氧2 h,复氧3、6、12、24 h,均用Q-VD-Oph处理),Western blot检测NLRP3蛋白表达,生化分析仪检测乳酸脱氢酶(LDH)水平;②将细胞分为正常对照组、缺糖缺氧组(缺糖缺氧2 h,复氧12 h)、实验组(缺糖缺氧0.5、1、1.5、2、3 h,复氧12 h,均用Q-VD-Oph处理),再次进行NLRP3及LDH测定;③细胞缺糖缺氧2 h、复氧12 h(用Q-VD-Oph处理)后免疫荧光观察NLRP3的表达.结果 缺糖缺氧2 h后,随着复氧时间的延长,NLRP3在12 h表达量最高,24 h表达量较12 h下降(P<0.05),LDH在12 h的表达量最高.缺糖缺氧时间不同,各组均复氧12 h时,NLRP3在缺糖缺氧 2 h表达量最高,3 h蛋白表达量较2 h下降(P<0.05),LDH在2 h的表达量最高.在缺糖缺氧2 h、复氧12 h,细胞免疫荧光强度最高.结论 NLRP3在原代皮质神经元细胞坏死样凋亡中有表达,且随着NLRP3表达量升高,细胞受损程度相应增高.
作者:刘芷含;陈巍巍;岳婵娟;吴明凤;滕雪;陈锐;杨龙;杜波;程言博
来源:徐州医学院学报 2017 年 37卷 5期