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目的动态检测酸性富含胱氨酸分泌型蛋白(SPARC)在角膜碱烧伤中的表达,为探讨SPARC基因在角膜创伤中的作用提供依据.方法首先建立角膜碱烧伤模型,并设角膜物理损伤组为对照组,在不同时间段提取各组角膜上皮细胞总RNA.用基因引物进行逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增,半定量SPARC mRNA的表达水平.然后对PCR扩增结果用限制性内切酶酶切验证.在取角膜上皮之前,对受试动物进行裂隙灯检查,以判断角膜碱烧伤程度与基因表达的关系.结果 (1)正常角膜上皮细胞可见SPARC基因的低表达;(2)SPARC在角膜碱烧伤及物理损伤后均见较高水平表达,且与正常细胞表达相比较有显著的统计学差异(P<0.05);角膜创伤越严重,基因表达水平越高;(3)所检测基因表达结果与显微镜观察角膜水肿、混浊、角膜新生血管等损伤结果呈同步趋势.结论 SPARC在角膜碱烧伤和创伤过程中具有高水平表达.是角膜创伤修复过程中的重要因素.

作者:李莹;李维业;庞国祥;王忠海;叶阿里

来源:眼科新进展 2002 年 22卷 1期

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作者:
李莹;李维业;庞国祥;王忠海;叶阿里
来源:
眼科新进展 2002 年 22卷 1期
标签:
角膜创伤 碱烧伤 基因表达 逆转录-聚合酶链反应 酸性富含胱氨酸分泌型蛋白
目的动态检测酸性富含胱氨酸分泌型蛋白(SPARC)在角膜碱烧伤中的表达,为探讨SPARC基因在角膜创伤中的作用提供依据.方法首先建立角膜碱烧伤模型,并设角膜物理损伤组为对照组,在不同时间段提取各组角膜上皮细胞总RNA.用基因引物进行逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增,半定量SPARC mRNA的表达水平.然后对PCR扩增结果用限制性内切酶酶切验证.在取角膜上皮之前,对受试动物进行裂隙灯检查,以判断角膜碱烧伤程度与基因表达的关系.结果 (1)正常角膜上皮细胞可见SPARC基因的低表达;(2)SPARC在角膜碱烧伤及物理损伤后均见较高水平表达,且与正常细胞表达相比较有显著的统计学差异(P<0.05);角膜创伤越严重,基因表达水平越高;(3)所检测基因表达结果与显微镜观察角膜水肿、混浊、角膜新生血管等损伤结果呈同步趋势.结论 SPARC在角膜碱烧伤和创伤过程中具有高水平表达.是角膜创伤修复过程中的重要因素.