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目的探讨新型染料羧基荧光素乙酰乙酸[5-(and-6)-carboxyflurescein diacetate,succinimidyl ester,CFDA-SE]与免疫组化方法相结合在视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelial cells,RPECs)移植中应用的可行性.方法用CFDA-SE(10 μmol·L-1)标记供体RPECs,37 ℃下孵育1 min,通过玻璃体视网膜显微手术将细胞悬液植入同种异体青紫蓝兔视网膜下腔,分别在30 d和60 d时处死实验兔,荧光显微镜下观察标记的供体细胞,同时作紧密连接的结构蛋白ZO-1和细胞骨架蛋白Actin的免疫组化分析.结果荧光显微镜下观察到标记的供体RPECs可嵌插于宿主RPECs之间,铺成单层结构,并形成新的细胞间紧密连接,ZO-1、Actin的免疫组化结果经统计分析表明与原位RPECs之间的表达无显著差异(ZO-1:︱t︱=2.05,P《0.05;Actin:︱t︱=2.14,P《0.05).结论 CFDA-SE是一种快捷、稳定、安全的活体细胞染料,可作为理想的标记物应用于RPECs移植中.

作者:刘春艳;孙大卫;宁静;彭绍民

来源:眼科新进展 2006 年 26卷 5期

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刘春艳;孙大卫;宁静;彭绍民
来源:
眼科新进展 2006 年 26卷 5期
标签:
视网膜色素上皮细胞 羧基荧光素乙酰乙酸 移植 免疫组化
目的探讨新型染料羧基荧光素乙酰乙酸[5-(and-6)-carboxyflurescein diacetate,succinimidyl ester,CFDA-SE]与免疫组化方法相结合在视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelial cells,RPECs)移植中应用的可行性.方法用CFDA-SE(10 μmol·L-1)标记供体RPECs,37 ℃下孵育1 min,通过玻璃体视网膜显微手术将细胞悬液植入同种异体青紫蓝兔视网膜下腔,分别在30 d和60 d时处死实验兔,荧光显微镜下观察标记的供体细胞,同时作紧密连接的结构蛋白ZO-1和细胞骨架蛋白Actin的免疫组化分析.结果荧光显微镜下观察到标记的供体RPECs可嵌插于宿主RPECs之间,铺成单层结构,并形成新的细胞间紧密连接,ZO-1、Actin的免疫组化结果经统计分析表明与原位RPECs之间的表达无显著差异(ZO-1:︱t︱=2.05,P《0.05;Actin:︱t︱=2.14,P《0.05).结论 CFDA-SE是一种快捷、稳定、安全的活体细胞染料,可作为理想的标记物应用于RPECs移植中.