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目的 研究JNK细胞信号通路在高压氧(hyperbaric oxygen,HBO)和过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)影响晶状体上皮细胞活力和凋亡中的作用.方法 培养人晶状体上皮细胞系SRA01/04,实验分为对照组、SP600125组(20 μmol·L-1)、HBO组(体积分数95%O2+体积分数5% CO2,600 Pa)、HBO+ SP600125组、H2O2组(200 μmol·L-1)和H2O2+ SP600125组,处理6h后收集细胞,应用MTT法检测各组细胞活力,Annexin V-FITC凋亡试剂盒处理细胞后用流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率,通过Western-blot法检测各组细胞JNK、p-JNK、c-Jun、p-c-Jun、caspase 3、caspase 9的表达情况.结果 作用6h后,HBO和H2O2处理的晶状体上皮细胞A570分别为0.423±0.047和0.406±0.069,较对照组的0.824±0.065明显下降(P<0.05),细胞凋亡率为(19.773±1.147)%和(29.206±1.678)%,较对照组的(2.184±1.015)%明显上升(P<0.05),SP600125可部分抑制HBO和H2O2对晶状体上皮细胞活力和凋亡的影响,HBO和H2O2处理的晶状体上皮细胞p-JNK、p-c-Jun蛋白表达量及caspase 3、caspase 9蛋白表达量升高,Sp600125可部分抑制高压氧和H2O2诱导的晶状体上皮细胞p-JNK、p-c-Jun、caspase 3、caspase 9蛋白高表达.结论 HBO和H2O2可激活晶状体上皮细胞中JNK细胞信号通路,促使

作者:畅立斌;鲍永珍;黎晓新;肖林

来源:眼科新进展 2014 年 34卷 10期

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作者:
畅立斌;鲍永珍;黎晓新;肖林
来源:
眼科新进展 2014 年 34卷 10期
标签:
高压氧 过氧化氢 晶状体上皮细胞 JNK细胞信号通路 caspase 9 hyperbaric oxygen H2O2 human lens epithelial cells JNK-signaling pathway caspase 9
目的 研究JNK细胞信号通路在高压氧(hyperbaric oxygen,HBO)和过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)影响晶状体上皮细胞活力和凋亡中的作用.方法 培养人晶状体上皮细胞系SRA01/04,实验分为对照组、SP600125组(20 μmol·L-1)、HBO组(体积分数95%O2+体积分数5% CO2,600 Pa)、HBO+ SP600125组、H2O2组(200 μmol·L-1)和H2O2+ SP600125组,处理6h后收集细胞,应用MTT法检测各组细胞活力,Annexin V-FITC凋亡试剂盒处理细胞后用流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率,通过Western-blot法检测各组细胞JNK、p-JNK、c-Jun、p-c-Jun、caspase 3、caspase 9的表达情况.结果 作用6h后,HBO和H2O2处理的晶状体上皮细胞A570分别为0.423±0.047和0.406±0.069,较对照组的0.824±0.065明显下降(P<0.05),细胞凋亡率为(19.773±1.147)%和(29.206±1.678)%,较对照组的(2.184±1.015)%明显上升(P<0.05),SP600125可部分抑制HBO和H2O2对晶状体上皮细胞活力和凋亡的影响,HBO和H2O2处理的晶状体上皮细胞p-JNK、p-c-Jun蛋白表达量及caspase 3、caspase 9蛋白表达量升高,Sp600125可部分抑制高压氧和H2O2诱导的晶状体上皮细胞p-JNK、p-c-Jun、caspase 3、caspase 9蛋白高表达.结论 HBO和H2O2可激活晶状体上皮细胞中JNK细胞信号通路,促使