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目的 探讨敲除Toll样受体2(toll-like receptor2,TLR2)基因后是否抑制同种异体小鼠角膜排斥反应的发生.方法 以BALB/c为供体,各取30只C57BK/6和同背景TLR2基因敲除鼠为受体行右眼角膜移植术,设为野生组(WT)和基因敲除组(KO);取19只C57BL/6行右眼自体角膜移植术,为自体组(ISO);各取9只C57BK/6和TLR2基因敲除鼠分别设为野生对照组(WT control)和基因敲除对照组(KO control).术后每周两次观察植片并记录免疫排斥的发生时间;术后14 d,收集术眼同侧颈部淋巴结,行流式细胞术分析CD4+T细胞百分比;收集术眼角膜,行免疫组织化学染色和实时荧光定量PCR检测角膜干扰素(interferon,IFN)-γ、TLR2和MyD88的表达.结果 WT组和KO组小鼠角膜移植术后中位生存时间KO组(35.0±3.8)d长于WT组(21.0±1.5)d(P <0.05).流式细胞术分析显示,WT组同侧颈部淋巴结CD4+T细胞百分比较WT control组明显增高(P<0.05),而ISO和KO组相对于其对应的control组(WT/KO control)差异均无统计学意义(均为P>0.05);免疫组织化学结果显示,ISO和KO组间角膜IFN-γ和MyD88分子表达无差异,但两者均低于WT组.KO组角膜几乎不表达TLR2分子,ISO组有微量表达,WT组表达明显增高;PCR检测显示,ISO和KO组角膜IFN-γ和TLR2 mRNA相对表达量差异均无统计学意义(均为

作者:苏亚茹;白浪;汤明芳;于健;刘晶;孙宇飞;孟婷

来源:眼科新进展 2016 年 36卷 11期

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作者:
苏亚茹;白浪;汤明芳;于健;刘晶;孙宇飞;孟婷
来源:
眼科新进展 2016 年 36卷 11期
标签:
Toll样受体2 基因敲除 MyD88 角膜移植 免疫排斥 CD4+T细胞 干扰素-γ toll-like receptor 2 gene knock-out Myd88 corneal transplantation immune rejection CD4 + T cell IFN-γ
目的 探讨敲除Toll样受体2(toll-like receptor2,TLR2)基因后是否抑制同种异体小鼠角膜排斥反应的发生.方法 以BALB/c为供体,各取30只C57BK/6和同背景TLR2基因敲除鼠为受体行右眼角膜移植术,设为野生组(WT)和基因敲除组(KO);取19只C57BL/6行右眼自体角膜移植术,为自体组(ISO);各取9只C57BK/6和TLR2基因敲除鼠分别设为野生对照组(WT control)和基因敲除对照组(KO control).术后每周两次观察植片并记录免疫排斥的发生时间;术后14 d,收集术眼同侧颈部淋巴结,行流式细胞术分析CD4+T细胞百分比;收集术眼角膜,行免疫组织化学染色和实时荧光定量PCR检测角膜干扰素(interferon,IFN)-γ、TLR2和MyD88的表达.结果 WT组和KO组小鼠角膜移植术后中位生存时间KO组(35.0±3.8)d长于WT组(21.0±1.5)d(P <0.05).流式细胞术分析显示,WT组同侧颈部淋巴结CD4+T细胞百分比较WT control组明显增高(P<0.05),而ISO和KO组相对于其对应的control组(WT/KO control)差异均无统计学意义(均为P>0.05);免疫组织化学结果显示,ISO和KO组间角膜IFN-γ和MyD88分子表达无差异,但两者均低于WT组.KO组角膜几乎不表达TLR2分子,ISO组有微量表达,WT组表达明显增高;PCR检测显示,ISO和KO组角膜IFN-γ和TLR2 mRNA相对表达量差异均无统计学意义(均为